APPL1在结直肠癌中的表达和临床意义.pdfVIP

摘要 APPLl在结直肠癌中的表达及临床意义 研究生 张嫣 导师 宋敏 郑州大学第一附属医院肿瘤科 河南郑州450052 摘 要 目的与背景 结直肠癌(colorectal 1年美国 cancer,CRC)，是最常见的恶性肿瘤之一．201 《临床医师癌症杂志》公布癌症统计数据显示，2008年预计美国新发结直肠癌 141，120例，死亡49，380例，其发病率和死亡率均居恶性肿瘤第三位，占消化 系统肿瘤首位【l】。在我国，结直肠癌发病率呈逐年上升趋势，发病率和死亡率分 别位列癌症第4位和第5位；在北京上海等城市，结直肠癌的发病率已跃居第 2或3位。目前临床上治疗结直肠癌手段包括手术切除、放化疗、辅助放化疗、 分子靶向治疗等，但多数患者就医时已为晚期，5年生存率较低，疗效不佳。已 知结直肠癌的发生发展涉及多基因改变和多阶段致癌的复杂过程，信号转导异 常在此过程中占主要地位，因此针对胞内信号转导蛋白进行靶向治疗已经成为 抗癌治疗的一个研究热点。 PHdomain，PTBdomainandleucine containing zipper APPLl(adaptorprotein Mitsuuch[2】等人利用酵母双杂交技术发 motif)又称DIPl3a，是99年由Yasuhiro 现与AKT2相互作用的一种胞内衔接蛋白，包括BAR、PH和PTB三个多功能 结构域。APPLl利用不同结构域与多种膜受体和胞内信号分子相互作用，参与 胞内多条信号通路的传导，在细胞存活、生长、增殖以及凋亡等过程中发挥重 要作用。研究发现，APPLl在结肠癌【31、前列腺癌【41、卵巢癌【5】等细胞株中均有 表达，但发挥的作用并不相同，是促癌基因还是抑癌基因尚无定论，作用机制 也并不清楚。目前尚无实验证实APPLl在人结肠癌组织中的表达情况，因此本 摘要 研究通过检测APPLl蛋白在结直肠癌及正常组织中的表达情况，分析APPLl 与结直肠癌临床病理参数的关系，初步探讨APPLl蛋白在结直肠癌发生发展中 潜在作用以及可能作用机制。 材料与方法 1资料收集郑州大学第一附属医院2011．03／12期间手术切除并经病理证实为结 直肠癌组织标本35例，其中结肠癌18例，直肠癌17例；男25例，女10例， 管状腺癌27例、 平均年龄57．8岁±11．9岁(39岁．82岁)；按组织学类型划分： 乳头状腺癌3例、黏液腺癌3例、印戒细胞癌2例，按分化程度划分：高分化 无淋 划分： I期8例、II期22例、IⅡ期5例、Ⅳ期0例；淋巴结转移7例， 巴结转移28例，同时选取27例痔疮患者的正常直肠黏膜组织标本作为正常对 照组， 平均年龄42．0岁±8．7岁(26．57岁】。所有标本一分为二，一组经4％甲 醛液固定、石蜡包埋，4弘m连续切片后用于免疫组化，另一组于术后30分钟 内取出投入液氮中用于RT-PCR检测。所有患者术前均未接受放疗、化疗及靶向 治疗。 2主要试剂：兔抗人APPLl多克隆抗体购自BBI公司，sP免疫组化试剂盒购于 自BBI公司，逆转录试剂盒来自Fennentas公司。 3引物APPLl基因引物(350bp) 上游5-CATCCAGAAAGAAACAACACCA．3’； 下游5-．CArIIAAGGTATCCAGCCT丌CG．3’； 8．actin基因引物(205bp)． 上游5-TGACGTGGACATCCGCAAAG； 公司设计合成。 4方法 4．1免疫组织化学染色：采用S-P法，APPLl抗体与