APPPS1小鼠脑发育过程中树突棘及突触的变化.pdfVIP

CHANGES OF DENDRITIC SPINES AND SYNAPSES IN THE PROCESS OF BRAIN DEVELOPMENT IN APP/PS1 MICE A Dissertation Submitted to the Graduate School of Henan University in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Medicine By Shi Yujuan Supervisor: Prof. Jiang Enshe Yu Dongming Date May, 2015 摘 要 阿尔兹海默病(Alzheimer disease，AD)是一种中枢神经系统（Central Nervous System, CNS ）退行性疾病，以进行性记忆减退和认知功能障碍主要的临床特征，其它特征还有 生活能力下降以及精神和行为异常等，给中枢神经系统造成重大损害。阿尔兹海默病的 发病率在逐年上升，此趋势还在继续，并且已经严重影响到了患病老年人的身体健康与 正常的日常生活，成为家庭和社会负担的重要来源，仍是一个世界性难题。但是，AD 的病因至今仍不明确。神经元间的通信主要发生在突触。突触丢失和突触功能异常被广 泛认为是阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease ，AD ）认知损害的机制。树突棘作为突触 后成分主要组成部分，是兴奋性神经传递的主要的突触后位点。树突棘独特的构造使它 具有特殊的作用。很多导致认知障碍的疾病如唐氏综合症、脆性X 综合征以及癫痫也发 生有树突棘形态和数量的异常, 进一步说明了树突棘的重要性。因此，树突棘是中枢神 经系统中至关重要的结构，其对维持神经系统正常功能起着非常重要的作用。在AD 中， 树突棘已成为研究热点。研究发现在AD 患者脑中有树突棘丢失和突触退化等现象。但 是在AD 发病进程中，对于随Aβ 积聚过程中，树突棘的形态的改变是怎样的，尚不清 楚。本文就该问题采用β-淀粉样前体蛋白APPswe 和早老素基因PS1-dE9 双转基因小鼠 （APP/PS1 小鼠，TG ）以及同窝野生型小鼠（WT ）为研究对象，利用亲脂性碳花青染 料 1, 1’二（十八烷基）-3, 3’, 3’, 3’- 四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐 （1, 1’-dioctadecy 1-3,3,3’-tetramethylindocar bocyanine perchlorate, DiI ）散射、免疫组织化学和透射电子显 微镜技术分别对两组小鼠P0-P12m 海马中树突棘和突触的形态学变化进行观察分析。探 讨这两种小鼠发育过程中海马CA1 区树突棘及突触变化的规律及其可能的机制。 目的：检测APP/PS1 小鼠发育过程中树突棘和突触的变化，阐明AD 发病过程中Aβ 积累与年龄依赖的树突棘和突触病理变化的先后顺序和因果关系。 方法：分别取APP/PS1 转基因模型鼠与同窝野生型小鼠不同发育时间点(P0、P7 、 P14 、P30 、P1m 、P3m 、P6m 、P12m) 的海马，使用DiI-散射方法观察两组小鼠海马CA1 区锥体细胞树突棘的形态和密度，免疫组织化学方法观察海马 CA1 区内突触素 SY （Synaptophsin, SY）以及淀粉样斑块（β-amyloid, Aβ ）表达变化并用透射电镜观察突触 表面的树突棘超微结构变化。