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2017-09-03 发布于贵州
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BMP2及TGFβ3双基因真核表达载体的构建与鉴定.pdf

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BMP2及TGFβ3双基因真核表达载体的构建与鉴定

13 BMP2和TGF3双基因真核表达载体的构建与鉴定中文摘要 13 目的本实验旨在扩增BMP2和TGF B B3，为研究双基因共转染间 3的双基因真核表达载体pIERS—BMP2一TGF 充质干细胞及其在体内的表达情况和可能存在的协同效应奠定基础。并将其连入双基因真核表达载体pIRES，筛选出阳性重组质粒 B3基因全长，将TGFB B 重组质粒pIRES-BMP2一TGF3，并进行测序鉴定。 B 结果成功的克隆出BMP2和TGF3基因，并将其连接到目的载体 pIRES中，双酶切和质粒测序证实连接正确，且基因的开放阅读框架正 B3双基因真核表达载体构建成功。确，p工RES—BMP2一TGF 结论利用PCR，DNA重组等分子生物学技术，成功构建了双基因真 B3，为进一步研究双基因共转染间充质干核表达载体pIRES—BMP2一TGF 细胞，探讨其在体内的表达情况，对间充质干细胞成骨分化的影响及可能存在的协同效应奠定基础。硕士研究生：马小松(运动医学) 导师：刘金钊副教授 3；真核表达载体关键词：骨形态发生蛋白2；转化生长因子13 ／㈣ Bicistronic IdentificationofPIRES-BMP2一TGF63 Constructionand Vector EukayoticExpression Abstract Toconstructa bicistronic vector Objective eukayoticexpression plRES·-BMP2·—TGFB3 Methods BMP2wasobtainedfrom plasmid Firstly,thegene pGEMT／BMP2 itwasinsertedintobicistronic PCR．Then eukaryoticexpressionplasmid by was vector recombinant obtained；Second， plRES．The plasmidplRES-BMP2 TGFB3wasextractedfromhuman tissue the embryonalbyRT-PCR，then wasinsertedintothe