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BMSCs通过增强自噬发挥神经保护作用 中文摘要 BMSCs通过增强自噬发挥神经保护作用 中文摘要 目的: 骨髓基质细胞（BMSCs）是具有神经保护作用的多能干细胞，尽管细胞 分化替代及旁分泌机制被广泛认可 ，但是它真正的神经保护作用的机制并不清楚， 本文就是为了探讨BMSCs是否可以通过自噬增强来发挥神经保护作用。 材料与方法 利用分子克隆技术与慢病毒转染的方法获得过表达人野生型及: 致病突变A53Tα-突触核蛋白（α-synuclein）单克隆人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株； 稳定过表达突变型A53Tα-synuclein 的SH-SY5Y细胞经氧化呼吸链抑制剂鱼藤酮处 理后与BMSCs共培养，MTT法测定共培养组与非共培养组细胞存活率变化；蛋白免 疫印迹法观察自噬水平和α-synuclein变化；AnnexinV-PE/7-AA 双染流式细胞术测 定细胞凋亡率变化。自噬抑制剂3-MA和自噬诱导剂雷帕霉素预处理24 小时后与 BMSCs共培养观察以上指标的变化。 : A53Tα-synuclein SH-SY5Y 结果 鱼藤酮会降低过表达 的 细胞存活率，呈时间 与剂量依赖性，BMSCs可以保护细胞免受鱼藤酮引起的细胞损伤；BMSCs可以增强 A53T细胞的自噬水平和减少α-synuclein的聚集；BMSCs还可以降低鱼藤酮引起的细 胞凋亡。自噬诱导剂雷帕霉素可以增强BMSCs细胞保护作用、增强自噬和降低凋亡 率，相反自噬抑制剂3-MA降低BMSCs的细胞保护作用，抑制自噬，增加细胞的凋 亡率。 结论:BMSCs通过增强自噬降低α-synuclein的水平，进而提高细胞的存活率， 降低细胞凋亡率。BMSCs移植是一种有效帕金森病的治疗措施。 关键词：骨髓基质细胞；自噬；共培养；鱼藤酮；α-突触核蛋白 作 者：东惟玲 指导教师：方 琪 单立冬 I BMSCs通过增强自噬发挥神经保护作用 中文摘要 BMSCsprotectrotenone-inducedα-synucleinoverexpressing SH-SY5Ycelltoxicitybyincreasingautophagy Abstract Objective：TodeterminedwhetherratBMSCsprotectrotenone-inducedcelldeath inα-synucleinoverexpressingSH-SY5Ycellsbyautophagyenhancement. Method In this study, molecular clone technology and lentiviral vector infection ： methods were used to obtain the overexpressing wild-type and pathogenic mutations α-synuclein monoclonal SH-SY5Y cell lines;We co-cultured BMSCs with SH-SY5Y cells overexpressingA53Tmutantα-synucleinexposedtorotenone,thenobservethecellviability byMTTmethod.Weexploredtheroleofautophagyby immunoblottinganalysis.Apoptosis wasanalyzedusingtheAnnexinV-PEa