Cathepsin B在柯萨奇病毒B1诱导的多发性肌炎模型中的表达和其意义.pdfVIP

中文摘 要 A B S T RA C T 中英文对 照 … … 队︵ U 第 一 章 前 言 … … 7 第 二章 材料 和 方 法 实验材料 实验 方法 … … 一 第三 章 结果 第 四章 讨 论 第 五 章 结论 … … 参考 文献 … … 附 图 综 述 参考 文献 … … ，.… … 致 谢 … … 52 攻 读 学位 期 间发表 的论 文情 况 ..… … Cath ep sin B 在柯 萨奇病毒 B1 诱 导 的多发 性肌 炎模 型 中 的表达及其 意义 中文摘要 背 景 : 多发性肌 炎 (Po lymy ositis，PM) 的病 因和 发病机制 尚不清 楚 。 目前认 为 是 由细胞 免疫介 导 ，在特 定遗传 易感性背 景下 ， 由环境 因素 (病毒 、紫外 线等 ) 诱 发 而 发病 。 己有 许 多文 献报 道 溶 酶体 中的组织 蛋 白酶 B (CatheP S in B ，CB) 可 介 导炎症和 凋亡 的发 生 ，并且在肌 萎缩 的蛋 白水解 过程 中发挥着重要 作用 ，而 目 前 国 内外 尚未见 CB 参 与 PM 发病 的相 关报 道 。 目的 : 本研 究通过检测在柯 萨奇病 毒 (Cox sacki eviru s BI ，CvB I) 病毒诱 导 的 PM 动物模 型骨骼肌 纤 维 中 CB 、CDS +T 细胞 与肌细 胞 凋亡 的表达 水平 ，用 CB 特 异 性 抑 制 剂 CA一074 M e 干 预 的 PM 中 CB 的变 化 ，探 讨 CA一074 Me 对 CB 的影 响 以阐 明其对肌 纤维 的保 护作用机 制 ，从而 为 临床 治疗 PM 提供理论基础和 治疗 思路 。 方法 :将体 重 为 158 士209 的健 康 雌性 40 只短 毛英 国种豚 鼠随机 分 为正 常组 (下8 ， D 组) 、PM 模 型组 (n 8 ，C 组) 、假干 预 组 (n 8 ，E 组) 、 阳性对 照 组 (n 8 ，B 组) 和 CA一074 M e 干预 组 (n 8 ，F 组) 。采用 CvBI 感 染和 兔肌匀浆加完全 弗 氏佐 剂反 复免疫 正常豚 鼠以制 备 CVBI 诱 导 的 PM 模 型 。阳性对照 组在 PM 动物模 型建 立后 予 以 工FN 一Y 腹腔注射 连 续 4 周 ; CA一074 M e 干预 组在 CVBI 感 染 的次 日起 腹 腔注 射 1 周 ，假 干 预组 于 同一 时 间点腹腔注射 等 量 生 理 盐水 。相应 时 间点处死 动 物 留 取 血 液 以检测肌 酶 谱变 化 ; 取肌 组织进行病 理学观 察 ; 用 免疫 组织化 学分 别 检测 CDS+T 细胞 、CB 的表达 水 平 ; 原位 末端 标记法 (TUNEL) 检 测 各组豚 鼠骨骼 肌 细 胞 的凋 亡变 化 。 结果 : (1) 模 型成 功率 40 .2/00 ，PM 模 型组豚 鼠出现 典 型 的临床 症状 、肌 酶 谱 异 常升 高 、多灶性肌 炎病 理 改变 。实验组肌 酶谱均 高于正常组 (P0 .05) ; B 组 、 F 组 的肌酶谱均呈低水 平 升 高 ，与 E 组相 比具有 统计 学 意义 (P0.05 ) 。 (2) 正常 组 可检 测 到极 少量 凋亡肌 细 胞 ; 实验 组 的凋 亡指 数 均 高于 D 组 ，且有 显 著 差 异 ; F 组 凋亡 指 数 低 于 E 组 (P O，05) : 与之 相 反 ，B 组 分别 于 E 组 、F 组 凋亡 指数 比较 有 显著 差 异 (P0.05 ) 。 (3 ) 正常 组 中有 少量 CDS 、CB 表达 ，与之 相 比，实验 组 均表达 增 加 ; F 组 的 CDS 和 CB 的表 达 均 显 著低 于 E 组 (P0 .05) ; B 组 与 E 组 、F 组 CB 表 达 比较 均有 显 著差 异 (P (0.05 ) 。 结论 : (1) CB 在 PM 豚 鼠模 型 中存在 高表达 ，其介 导 的炎症和 凋亡在 PM 的发病 过程 中可 能起着 重要作用 。 (2) PM 豚 鼠模