Epiplakin基因敲除鼠及野生鼠舌的超微结构观察比较.pdfVIP

中文摘要 Epiplakin基因敲除鼠和野生鼠舌的超微结构观察比较 摘 要 白，是在表皮下水疱病患者血清中发现的一种自身抗原，在复层上皮及单 鼠(EPPK一‘鼠)和野生鼠的表型无明显差异。然而在伤口愈合过程中，基 因敲除鼠的角蛋白的迁移加速。EPPK缺乏的角质细胞中角蛋白丝的直径 个数据表明在伤口愈合过程中，EPPK在增殖的角质细胞中加速了角蛋白 的结合成束；并在有压力的情况下， EPPK可能有助于加强角蛋白网状 结构。截止目前为止，尚未见有关EPPK以鼠和野生鼠舌的超微结构变化 的研究，激光扫描共聚焦显微镜观察到野生鼠舌中有丰富的EPPK表达， 透明角质颗粒参与角蛋白的形成。本研究拟运用透射电子显微镜技术观察 EPPK4鼠和野生鼠舌的超微结构变化，特别是透明角质颗粒的变化，进一 步探索EPPK与角蛋白之间的关系及功能。 方法：将野生鼠和EPPK√’鼠鼠舌平均分8部分，从舌尖到舌根方向 依次编号1．8号。首先应用光学显微镜观察EPPK。鼠和野生鼠舌粘膜上 皮的结构，然后应用透射电子显微镜从冠状面对应编号观察并比较其超微 结构变化，特别是透明角质颗粒的变化。 结果： l光镜观察 1．1野生鼠舌粘膜上皮由下而上可见四层结构。基底层细胞呈立方 形，细胞排列呈波浪样起伏。棘层细胞呈圆形。基底层和棘层未见透明角 质颗粒。颗粒层细胞呈扁平形，在此层舌粘膜乳头间可见密集透明角质颗 l、3、5)。透明角质颗粒在HE染色 粒呈层状分布，其大小不一(见Fig 中呈强嗜碱性。角化层细胞扁平，覆盖在舌表面，未见透明角质颗粒。乳 头部可见透明角质颗粒沿突起呈线状排列，但数量较乳头之间部位少(见 舌尖厚，其他三层细胞形态无明显差异，颗粒层中透明角质颗粒不如舌尖 中文摘要 密集(见Fi97)。 1．2EPPK4鼠舌粘膜上皮分4层，基底层呈柱状，细胞呈波浪状起伏 排列。棘层细胞呈圆形。基底层和棘层未见透明角质颗粒。颗粒层可见透 明角质颗粒稀少，分布零散，分布无规律(见Fi92、4、6)。角质层细胞 扁平，未见透明角质颗粒。舌乳头基底部细胞呈柱状，无透明角质颗粒， 游离部可见透明角质颗粒，数量稀少(见Fi92、4、6)。舌根部无舌乳头， 舌根粘膜结构同舌尖乳头之间的结构无明显差异，透明角质颗粒稀少，分 布零散(见Fig．8)。 2透射电子显微镜观察 2．1低倍(4000倍)透射电镜下，野生鼠舌粘膜上皮细胞外形规则， 基底层细胞呈长的椭圆形，长轴与基底垂直。棘层细胞的长轴与基底平行， 在此层可见透明角质颗粒分布，呈圆形，数量不多。颗粒层可见大量透明 角质颗粒，呈圆形，主要在乳头之间分布(见Fi99)。角质层细胞几乎无 透明角质颗粒。EPPK。鼠舌粘膜上皮基底层细胞呈柱形，无透明角质颗粒 分布。棘层细胞形状似圆形，几乎无透明角质颗粒。颗粒层可见透明角质 颗粒，类圆形，分布零散(见Figl0)。各层细胞之间连接未见明显异常。 2．2高倍(25000倍)透射电镜观察：野生鼠透明角质颗粒外围部分 l、1 l、 电子密度较中央部位高(见Figl3)；细胞之间连接紧密(见Figl 体等细胞器未发现明显异常。此高倍透射电镜观察结构经ACDsee图像软 件处理后发现：EPPK。鼠的张力细丝较野生鼠的细。 结论： l光镜观察发现EPPK以鼠与野生鼠的舌粘膜上皮结构相比较， EPPK小鼠舌粘膜上皮颗粒层中的透明角质颗粒数量较野生鼠明显减少。 2电镜观察发现EPPK小鼠舌粘膜上皮中的透明角质颗粒较野生鼠舌 粘膜上皮中的透明角质颗粒：直径小；数目少；并缺少野生鼠透明角质颗 粒高电子密度的外围部分。EPPK。鼠舌粘膜上皮的细胞连接不紧密。张力 细丝较细。 总之，Epiplakin基因表达缺失引起了舌粘膜上皮细胞超微结构的变 化，尤其是透明角质颗粒的变化最明显。 中文摘要 白中间丝。 英文摘要 The