中草药中的萜类和有机胺类生物碱对细菌生长代谢作用的热动力学的分析研究.pdfVIP

摘要 中药是我国传统防治疾病的武器，蕴含着无比强大的生命力，天 然药物的成分分离、纯制、作用机理的研究已开展多年，药物化学已 成为化学、生物学科的学者关注的热点。生物碱是一类很重要的生物 活性物质，具有显著的生物活性。随着对生物碱的抑菌、促菌、抗肿 瘤、镇痛、麻醉、降压等活性的不断发现，人们对生物碱的药物化学 的研究也日益加快．对萜类生物碱和有机胺类生物碱的研究在天然产 物化学中一直占有很重要的地位，系统的研究萜类和有机胺类生物碱 的化学和生物活性，寻找有活性的先导化合物，进一步开发研究新药， 一直是人们研究的目标。 本文应用微量量热法研究了中药中的萜类和有机胺类生物旃对大 肠杆菌和金黄色葡萄球菌的代谢作用，借助热活性检测仪对细菌正常 代谢及生物碱液对细菌的代谢过程的热谱曲线进行测定，分析热谱图、 构建细菌生长的理论模型和热动力学方程，进行热动力学性质的研究， 为指导新特效药的合成提供了理论依据。 (一)主要研究内容 1．草鸟、石斛、川乌、雷公藤中生物碱的提取 萜类生物碱大都不溶于水，能溶于氯仿、乙醚、酒精、丙酮、苯 等有机溶剂，亦能溶于稀酸的水溶液生成盐类。通常用乙醇、苯来提 取生物碱．有些生物碱易冷浸，有些生物碱易热回流提取，所以提取 时对不同的药物使用了不同的方法。、 将萜类生物碱提取后，还可以将其纯化，经常使用的方法是溶剂 萃取法、层析法等．本实验主要使用溶剂萃取法，将粗生物碱溶于稀 酸中，调节pH值至10以上，用氯仿萃取多次，然后减压蒸馏回收氯 仿。 2．麻黄、山慈菇、益母草中生物碱的提取 有机胺类生物碱部分可以溶于水中，大都能溶于氯仿、乙醚、酒精、 丙酮或苯等有机溶剂。本实验用稀酸水、乙醇等提取。用溶剂萃取法 纯化生物碱。 (二)大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在舍有不同浓度生物碱液的培养基 中生长代谢的规律 为了确定生物碱对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌代谢作用的规律和 最佳用药浓度，分别将不同浓度的生物碱液加入接入菌种的液体培养 基中，形成悬浮液，测定了310K时大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在其中 生长的热功率一时间曲线，用Logistic方程对其指数生长期的曲线进行 处理，得到大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在舍有不同浓度的生物碱液的 培养基中的生长速率常数，进而求出生长速率常数与药物浓度的关系， 确定了最佳用药浓度。实验结果表明草乌、石斛、雷公藤三种中药中 的萜类生物碱对大肠杆菌的生长代谢具有促进作用，将它们的最佳促 茵浓度进行比较，顺序是雷公藤草乌石斛生物碱液；而草乌、川乌、 石斛三种中药中的萜类生物碱对金黄色葡萄球菌的生长代谢具有抑制 作用，将它们的最佳抑菌浓度进行比较，顺序是川鸟草乌石斛生物 碱液。同样的方法，确定了麻黄、山慈菇、益母草中的萜类生物碱对 大肠杆菌的生长代谢具有抑制作用，将它们的最佳抑菌浓度进行比较， 顺序是山慈菇益母草麻黄生物碱液；而麻黄、益母草中的萜类生物 碱对金黄色葡萄球菌的代谢作用也具有抑制作用，将它们的最佳抑茵 浓度进行比较，顺序是麻黄益母草生物碱液。 (三)本文的创新之处 1．方法新 微量量热法用于中草药对细菌的代谢作用的研究是一种新的手 段，首先它能直接监测生物体所固有的热力学过程，不需要添加任何 试剂，所以不会引入干扰生物体正常活动的因素；其次，它不需要制 成任何透明的澄清溶液，可直接监测微生物的组织和悬浮液：其三， 热测量完毕之后，并没有破坏研究体系，还可以补充必要的后继分析。 它不仅能提供热力学数据，而且可以提供动力学的信息。因此成为一 种新的、很有前途的研究手段，比抑茵圈法、光谱法更加方便可靠。 2．体系新 近年来，对于中药有效成分的研究多集中于强心甙、有机酸、氨 基酸等，而对于生物碱类化合物的抑茵作用虽有报道，但研究较少， 尚缺乏系统性．生物碱是一类具有应用价值的生物活性物质，我们将 萜类和有机胺类生物碱从中药中分离出来，作为研究体系，测定了大 肠杆茵和金黄色葡萄球菌在含有不同浓度生物碱液的培养基中生长代 谢的热功率一时间曲线，将实验数据进行处理，得出萜类和有机胺类 生物碱对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌代谢作用的规律，为生物碱在医 药学上的应用提供了理论基础． 3．结论新 以前对生物碱的活性研究报道多是生物碱的抑茵作用。本文进行 了药物对细菌生长代谢的抑茵和促菌作用的研究，构建了细茵生长模 型，计算出在不同条件下，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长速