MiR-335及胃癌侵袭转移的相关性及其机制的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· IiiR-335与胃癌侵袭转移的相关性及其机制的研究 目 的 直至19世纪中叶，胃癌始终是导致全世界癌症死亡的最主要的原因【11。尽管 近几十年来胃癌的发病率有所下降，但其死亡率仍然居高不下，排在所有癌症死 亡率的第二位【2】。对胃癌发生发展机制的研究尤其是对影响胃癌发生发展及侵袭 转移过程的分子机制的研究已成为胃癌研究的重点。 微小RNA是存在于动植物中的一类高度保守的非编码小分子RNA。它们可 以特异性的与靶基因mRNA的3’非翻译区发生互补结合。影响蛋白的翻译过程或 使靶基因mRNA降解，以此对靶基因产生抑制作用[3-5]。近年来，在胃癌中发现 许多微小RNA可能对胃癌产生作用，它们的差异表达与胃癌的发生发展、侵袭转 移等过程有着显著的相关性睁121。 MicroRNA．335表达下调与乳腺癌、肾上腺皮质癌及急性髓性白血病等多种 癌症的发生有密切联系【J3’1习。另有研究证明，低表达的miR-335与卵巢癌细胞发 生耐药性有显著关系【161，它在乳腺癌中的异常表达还发挥了抑制乳腺癌转移的作 用，可以通过抑制细胞转录因子SOX4，受体型酪氨酸蛋白磷酸酶N2，c．Mer原 C这些能够提高远处转移风险的基 癌基因酪氨酸激酶和细胞外基质成分tcnascin 因表达来抑制乳腺癌细胞的侵袭能力f17l。目前，有关胃癌中miR-335的表达及其 在胃癌中的作用的研究较少。因此，本研究旨在探讨在胃癌中miR-335的表达情 况，并研究其在胃癌发生、发展过程中的作用及分子机制。 方 法 一、微小RNA-335在人胃细胞系及胃癌组织中的表达 1、利用实时定量PCR技术检测miR-335在胃细胞系中的表达。 2 2、利用实时定量PCR技术检测miR-335在胃癌及配对癌旁组织中的表达。 二、微小RNA-335影响胃癌细胞的侵袭转移 性对照分别转入人胃癌SGC．7901、BGC．823和AGS细胞系。 力的影响。 3、动物实验检测miR-335高表达后在体内对SGC．7901细胞侵袭转移能力的 影响。 三、微小I矾A-335影响胃癌细胞侵袭转移的机制 1、利用生物信息学分析miR-335可能作用的靶基因及其作用位点。 2、利用荧光素酶报告基因检测miR-335在SGC．7901细胞中对其靶基因的调 节作用。 · 平上的验证。 结 果 一、微小RNA-335在人胃细胞系及胃癌组织中的表达 1、人胃癌细胞系中miR．335表达降低。 2、无淋巴转移的胃癌组织中miR-335表达显著升高。 3、胃癌组织中低表达的miR-335与淋巴转移、淋巴癌栓、不良T分期及不良 N分期有明显的相关性。 二、微小RNA-335影响胃癌细胞的侵袭转移 l、构建差异表达miR-335的SGC．7901、BGC．823和AGS细胞系。 2、体外实验证明miR-335抑制胃癌细胞侵袭能力。 3、动物实验证明miR-335抑制胃癌细胞迁移能力。 三、微小RNA-335影响胃癌细胞侵袭转移的机制 靶基因。 作用的靶基因。 3、Western 达显著降低。 一 编结 论，匕 l、胃癌细胞系中miR-335表达降低。 2、胃癌组织中miR-335表达与胃癌侵袭转移相关病理因素有显著相关性， miR-335表达量越低，胃癌侵袭越深、越容易发生淋巴转移。 3、过表达的miR-335抑制胃癌细胞侵袭转移能力。 4、miR-335可通过调节SPI和Bel．W基因表达发挥抑制胃癌侵袭转移作用。 关键词 微小RNA：胃癌；微小RNA．335；B细胞淋巴因子．w；特异性蛋白l 4 ·英文论著摘要·