Amide80系列色谱柱分离糖类中文2.pdfVIP

分离报告No.79 使用TSKgel Amide-80 高效正相分配色谱填料 分离糖类(2)* * 请参阅本系列055 号分离报告的 第 1 部分。 目录 1. 简介 1 2. 与三种不同的氨基键合硅胶填料比较 1 3. 流动相中有机溶剂的效应 2 4. 添加氨类到流动相 4 5. 高灵敏度分析 6 6. 结论 7 SR079 0108 1 1. 简介 2. 与三种不同的氨基键合硅胶填料比较 糖类在工业应用中是非常重要的物质，可作为食品、造纸、 2-1 化学稳定性 纸浆、纤维、酿造或发酵产品以及医疗产品的原料。近年来 发现复合碳水化合物的糖类和糖链结构域对生物机能发挥起 海藻糖 （一种非还原性糖）在TSKgel Amide-80 柱和三种 作用，因此它们作为重要生化物质受到越来越多的关注。因 氨基键合硅胶填料的容量因子(k’) 如图 1 所示。此研究是 此，工程、农业、科学、药学、医学等领域需要采取有效的 在等度流动相条件下进行，使用75% 乙腈/25% 水作为洗 方法对糖类或糖链进行分析。 脱液。TSKgel Amide-80 柱的分析在80℃下进行，以抑制 1,2 还原糖形成（和分离出）异构体。 有很多种采用高效液相色谱(HPLC) 分离糖类的方法 ， 包括硼酸络合阴离子交换色谱法、反相色谱法、正相色谱 法、离子排阻色谱法、离子色谱法、凝胶过滤色谱法、配 经过200 小时连续洗脱后，海藻糖的容量因子(k’) 在三种 位体交换色谱法、亲和色谱法以及强碱性条件下的阴离子 氨基键合硅胶填料中大幅下降。相对初始测量值，柱A 的 交换色谱法。 容量因子下降34%，柱C 下降32.7%，柱D 下降 21.5% 。对于TSKgel Amide-80 柱(B)，容量因子仅轻微 在这些方法中，正相色谱法基于亲水性差异对糖类进行分 下降3.8%，这表明酰胺固定相具备优越的化学稳定性。 离。糖类的亲水性由其羟基的数量和方向决定。由于寡糖 分子量可以通过保留或容量因子推断出来，糖类分离也被 3 称为体积分离色谱 。 4-6 传统上，氨基键合硅胶 常被用作糖类正相色谱法的填 料。然而，这些填料表现出较差的化学稳定性，且还原糖 的回收率较低。为了克服这些缺点，我们研发了一种采用 氨基甲酰基代替氨丙基来键合硅胶的填料(TSKgel Ami