Runx3基因启动子区域甲基化及小儿恶性淋巴瘤关系的研究.pdfVIP

1_■●I 目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………6 研究论文Runx3基因启动子区域甲基化与小儿恶性淋巴瘤关系的研究 前言………………………………………………………………………………………··13日U舌……………………………………………………………………一…………………13 材料与方法…………………………………………………………··14 结果………………………………………………………………………………………··21 附图、附表……………………………………………………………·26 讨论………………………………………………………………………………………··40 结{仑………………………………………………………………………………………··43 参考文献………………………………………………………………44 综述Runx3基因甲基化与肿瘤发生、发展的关系……………………47 致谢………………………………………………………………………………………………·60 个人简历…………………………………………………………………”6l 中文摘要 Runx3基因启动子区域甲基化与,bJL恶性淋巴瘤关系的研究 摘 要 目的：目前恶性肿瘤的发病呈逐年递增趋势，儿童患恶性肿瘤死亡的 人数也在不断增加，而肿瘤发病的确切病因尚不明确。对于肿瘤的病因现 在有多种观点，其中认为染色体结构和数量的改变是肿瘤形成的关键， 发生过程中起重要作用。DNA甲基化是表观遗传学上研究最深入的一种 机制。目前认为基因甲基化在正常细胞和肿瘤细胞中都存在，基因低甲基 化可促进基因的表达，而高甲基化则抑制基因的表达。Runx3基因又称人 runt．related 类RUNT相关转录因子3(human factor3，Runx3) transcription 是新近发现的抑癌基因，其失活的主要机制是启动子区域高甲基化和杂合 性缺失，与肿瘤的发生、发展有着密切的关系。Runx3基因的编码产物为 Runx3蛋白，其主要表达在造血系统中，包括脾、胸腺和外周血单核细胞， 它在B淋巴细胞的分化、脊神经节的神经发育和多种恶性肿瘤的形成过 程中有重要的调节作用，并能与其他辅助激活因子或辅助抑制因子共同作 用激活或抑制Runx特异性靶基因的转录。Runx3基因甲基化与胃癌、肺 癌、肝癌等多种肿瘤的发生、发展有关。恶性淋巴瘤是小儿最常见肿瘤之 因启动子区域甲基化在急性白血病的发病机制中起一定的作用，目前尚未 见到国内外关于Runx3基因甲基化与小儿恶性淋巴瘤关系的文献报道。 本实验通过研究恶性淋巴瘤患儿骨髓细胞中Runx3甲基化情况，并动态 观察处在不同化疗阶段Runx3基因甲基化情况的变化，探讨Runx3基因 甲基化在小儿恶性淋巴瘤的发生、发展过程中所起的作用，且用于观察化 疗效果、做为预后评估指标的价值，为临床靶向治疗及微小残留的测量提 供理论和实验室资料。 方法：选取确诊为恶性淋巴瘤患儿骨髓标本作为实验组，动态观察治 疗前、化疗前期(化疗1)、化疗中期(化疗2)、化疗后期(化疗3)、临 床缓解及复发时Runx3甲基化状态的变化。非恶性肿瘤患儿骨髓作为对 中文摘要 照组。采用甲基化特异性聚合酶链反应法(MS．PCR)检测骨髓细胞中 后的甲基化条带进行凝胶成像系统测定的荧光强度积分(IoD)值与外周 血白细胞计数(WBC)、骨髓淋巴瘤细胞计数(BLC)进行相关性研究。 采用SPSSl3．0统计软件进行统计学分析。所有计量数据用均数4-标准差 检验)，相关性分析采用直线相关分析，动态观察数据采用重复测量方差 分析。庐O．05有统计学意义。 结果： 1．实验组治疗前与对照组可比性比较：两组间年龄、性别比较无显著 性差异(po．05)，具有可比性。 基因甲基化条带，阳性率为88．9％(24／27例)，对照组20例均未检测出， 例