SOX9及VEGF在小儿先天性脊柱侧弯顶椎生长板软骨的表达研究.pdfVIP

摘要 SOX9和VEGF在小儿先天性脊柱侧弯顶椎生长板软骨的 表达研究 研究生： 骆晓飞 导N-刘福云 郑州大学第三附属医院d,Jg骨科 郑州450052 摘要 scoliosis，CS)是临床上较常见的一种小儿先天 先天性脊柱侧弯(Congenital 性脊柱畸形，其发生发展主要归因于先天存在的异常脊椎导致脊柱纵向不平衡 生长。在脊柱纵向发育过程中脊椎生长板软骨是纵向生长的基础，项椎作为先 天性脊柱侧弯的触发点，其生长板软骨的化骨活性直接关系到侧弯的发生发展 情况。以往研究已证实脊椎生长板具有类似长骨生长板的特性，生长分化受多 种细胞因子的调控。其中SOX9是一个与哺乳动物的性别决定因子SRY(Y染色 体上的性别决定区)具有高度同源性的转录因子，表达于除肥大软骨细胞外所有 分化型软骨细胞，并贯穿整个软骨形成过程，被认为在软骨内成骨的初始阶段 发挥着重要作用。血管内皮生长因子(vEGF)是刺激内皮细胞生长和血管再生的 一个重要因素，研究发现在软骨内化骨过程中对于软骨细胞死亡，细胞外基质 重塑，血管生成和骨骼形成是一种基本的调节物质。因此通过对侧弯顶椎凸凹 两侧生长板软骨VEGF和SOX9表达情况的检测可以判断侧弯两侧软骨板成骨 能力的差异，推断小儿先天性脊柱侧弯发病和进展的分子生物学基础，为进一 步的分子生物学研究奠定基础。 目的 通过免疫组化和mRNA原位杂交方法判定先天性脊柱侧弯患儿凸凹两侧生 I 摘 要 长板软骨SOX9和VEGF的表达部位和情况，了解两侧生长板软骨生物活性的 差异，发现SOX9和VEGF表达的相关性，探讨影响先天性脊柱侧弯发病和进 展的分子生物学基础。 方法 者，男8例，女12例，平均年龄3．2(3．24-0．9)岁，术前均接受详细的体格检 查和影像学检查(包括X线片，全脊柱螺旋CT+三维重建，MRI)。入院后经 患者直系亲属的知情同意后，取术中切除的半椎体凸凹两侧生长板软骨，常规 HE染色并应用免疫组化和mRNA原位杂交的方法对顶椎生长板的SOX9和 VEGF表达进行检测，观察SOX9和VEGF在顶椎生长板软骨的表达位置，以及 的表达进行相关性研究。凸凹两侧因子表达结果采用配对t检验，p0．05为差 异有统计学意义。相关性分析采用Pearson相关性分析，以po．05为检验水准。 曩}甲 ：日木 1、凸凹两侧生长板的形态学观察，两侧软骨板HE染色可见生长板有类似 长骨生长板的结构，大致可以分为静止层、增殖层和肥大层软骨区。凸侧生长 板软骨的增殖区和肥大区厚度更大，细胞排列也较紧密。 2、SOX9主要表达于静止层和增殖层软骨细胞，VEGF主要表达肥大软骨 区，少量表达于增殖层，但静止层未见表达。SOX9在凸侧生长板软骨表达量为 154．376士8．055，凹侧为121．4134-6．751，VEGF在凸凹两侧生长板软骨的表达量 分别为134．9894-9．731，108．4984-8．737，VEGFmRNA在凸凹两侧生长板的表达 为1 VEGFmRNA在项椎凸凹两侧生长板软骨的表达差异有统计学意义。 3．对脊椎生长板软骨SOX9和VEGF的表达进行Pearson相关性分析， 关性分析，间．343,p0．05。无统计学意义。 Ⅱ 摘要 结论 l、先天性脊柱侧弯患者顶椎生长板软骨，大体观凸侧较凹侧具有较高的生 物活性。 骨的表达量较凹侧高，这种表达差异可能是+JL先天性脊柱侧弯发病和进展的 关键因素。 3、SOX9和VEGF在脊椎生长板不同软骨区表达量不同。整体分析，SOX9 和VEGF的表达存在正线性相关。 VEGF 关键词：先天性脊柱侧弯顶椎生长板SO