Smac模拟物SM-164对乳腺癌的放射增敏作用及机制研究.pdfVIP

摘要 摘要 乳腺癌是女性最常见的肿瘤，是女性首要的肿瘤死亡原因。放射治疗在乳腺 癌的局部控制，特别是对于进行保守性手术病人，发挥关键性作用。但是肿瘤 细胞固有的放射抵抗性降低了放射治疗的效果。IAPs家族的主要作用是通过与 活性的caspase一3、一7和一9结合，并且阻碍它们的功能，最终抑制凋亡形成、 是一种线粒体蛋白，在凋亡过程中从线粒体中释放，激活被clAP—l、XIAP等阻 胞凋亡发挥着开关的作用。BM一771是一种新合成的BCL一2抑制剂，可以拮抗 BCL一2家族的抗凋亡作用。 目的：评价SM一164在乳腺癌细胞中的放射增敏作用，探讨SM-164放射增敏 的作用机制。评估BM一771在乳腺癌细胞中的放射增敏作用。 方法：(1)采用免疫印迹法检测6个常见乳腺癌细胞的IAPs和BCL一2家族 蛋白表达和SM一164对clAP—l的降解作用。利用ATPlite法分析SM-164和BM一771 对肿瘤细胞的生长活性抑制。采用克隆形成实验评价SM一164和BM一771的放射 治疗组、x线照射组和联合治疗组。通过观察细胞形态变化、FACS分析、DNA 阻断SM-164的放射增敏作用。 高表达的乳腺癌细胞，SM一164能引起乳腺癌细胞clAP一1的快速降解。高表达 大部分高表达clAP一1的乳腺癌细胞株耐受，使用纳摩尔级的治疗浓度，在 SM一1 联合治疗后，出现皱缩、分离、脱落等凋亡形态学变化；FACS分析显示凋亡细 Il 摘要 细胞，SM一164引起可观的DNA片段，且在联合射线治疗后进一步增加；活性PARP 和活性caspase一3蛋白表达显示二者被人量的激活；这些结果强烈支持SM一164 的放射增敏是由于促进凋亡形成，并且caspase激活有关。在caspase一3、一8 细胞是通过激活caspase一9、一3，引起内源性线粒体通路介导的凋亡；在 死亡受体通路介导的凋亡。在两个细胞株中，泛caspase抑制剂(z—VAD—fmk) iRNA 可抑制联合治疗的凋亡DNA片段形成和大部分阻断和SM一164的放射增敏。s caspase-8则没有效果，SER从1．57降到l-55。 结论：SM164是一个高效、潜在的新型乳腺癌放射增敏药物，具有较小的 细胞毒性。BCL-2家族抑制剂BM一771具有直接的乳腺癌细胞杀伤作用，但不能 增加乳腺癌细胞的放射敏感性。SM-164在乳腺癌中放射增敏作用的机制主要是 导致caspase-9和一3的激活，通过DNA损伤通路促进凋亡形成。 关键词：凋亡；caspase激活；XIAP；cIAP一1降解；放射增敏 Ill ABSTRACT ABSTRACT Breastcanceristhemost cancerandthe causeof frequentlydiagnosed leading cancerdeath isatreatmentchoiceforlocalcontrolof amongfemales．Radiotherapy breast aftertheremovaloftumortissues cancer,particularly bysurgery．However, ofcancerlimits mainfunction intrinsicradioresistancecells therapeuticefficacy．The to and ofIAPsis via to