TFF2及转录因子Sp3相互作用及在胃癌细胞中的功能学研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的：验证三叶因子2(TFF2)与转录因子sp3的结合关系，初步研究TFF2 及Sp3相互作用在胃癌细胞中的功能，进而探索二者的作用机制，从而为胃癌的 早期诊断及分子靶向治疗提供理论依据和新的方向。 方法：本研究在前期的酵母双杂交实验基础上，筛选TFF2候选结合蛋白sp3， 使用免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀方法，明确TFF2及Sp3的共定位及结合关系； 利用siRNA干扰及过表达技术，构建稳定干扰sp3和(或)过表达TFF2的4 TFF2及Sp3对胃癌细胞增殖、凋亡、周期、迁移及侵袭能力的影响；使用蛋白 blot进～步 芯片技术检测TFF2与Sp3对凋亡信号通路蛋白的影响，用W色stem 明确相关信号通路蛋白水平的变化情况，深入研究TFF2与Sp3在胃癌细胞凋亡 和细胞周期的作用机制。 结果：实验前期，我们通过酵母双杂交系统，得到TFF2的候选结合蛋白转录 因子Sp3，经免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀证实1nFF2与Sp3存在共定位及结合 关系。体外细胞功能实验显示，Sp3增强胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭能 力，而对细胞周期具有促进作用；TFF2则抑制胃癌细胞的增殖、迁移能力，将 细胞周期阻抑于Gl期，促进细胞凋亡及侵袭能力；而过在二者共同存在时，胃 癌上述功能亦有明显改变。信号通路蛋白电泳分析显示，TFF2与Sp3对Bcl2家 K 族蛋白和NFB信号通路蛋白具有显著的影响。 结论： 转录因子sp3是TFF2的结合蛋白，TFF2与sp3可影响胃癌细胞的增 殖、凋亡、周期、迁移及侵袭等功能，且二者存在相互作用，并可影响胃癌的发 生发展。 胃癌 关键词：三叶因子2转录因子Sp3 Abstract Abstract oftrefo订factor veri母thebindingrelationship 2(TFF2)锄d objective：To functionofTFF2and in factor the Sp3 studyprelimina叮on tr锄scriptionSp3，and astheroleoftwo on of cancerceIlsaswell deVelopmentgastric gastric proteins oftwo on of themechanism cancer．Furthemore，toexplore proteinsapoptosisgastric andanewdirectionforthe cancer atheoreticalbasis early cells，whichprovide molecular of c醐cer孙d targetedthefapy． gaStric diagnosis selected factorasthecandidate Methods：Inthis Sp3