Th17细胞及Graves病的相关研究.pdfVIP

中文摘要 Thl 7细胞与Graves病的相关研究 摘 要 目的：Graves病(Gravesdiseasej GD)是一种由于自身免疫导致的 器官特异性自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid 临床表现为不同程度的弥漫性甲状腺肿、甲状腺毒症、浸润性突眼、胫前 粘液性水肿，自身抗体产生、甲状腺组织淋巴细胞浸润是其重要病理特征。 但详细的免疫学发病机制尚不清楚。 导靶细胞产生趋化因子、集落刺激因子(colonystimulating necrosisfactor 肿瘤坏死因子Q(tumor 吸引中性粒白细胞和单核细胞到达炎症部位，促进或扩大炎症反应。已有 研究表明，Thl7细胞在类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮 等自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用。GD是典型的自身免疫性甲状 腺疾病，其发病机制尚不清楚，本研究拟通过应用流式细胞术分析外周血 immunosorbent 疫吸附试验(enzyme．1inked mRNA的表达量：应用免疫组织化学染色方法检测甲状腺组 IFN-小IL．4 作用。 方法： 1研究对象及材料 收集30例初发未经过任何治疗的GD患者，诊断标准参照《中国甲 病患者手术切除的甲状腺和3例创伤死亡的正常甲状腺组织。 2方法 中文摘要 2．1血清TSH、FT3、FT4水平的检测 用商用电化学发光法检测初发GD患者和正常对照组的血清中促甲 状腺激素(thyroidstimulating thyroxine，FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(free 水平。 2．2 PBMC中Thl7细胞数量检测 mAb、抗人CD28 采用密度梯度离心法分离新鲜PBMC，经抗人CD3 mAb刺激培养24小时后，取PBMC2x105个，应用流式细胞术检测初发 胞的数量。 2．3PBMC培养上清中IL．17水平检测 采用密度梯度离心法分离新鲜PBMC，经抗人CD3mAb、抗人CD28 mAb刺激培养24小时后，取上清，用人IL．17ELISA试剂盒检测初发GD 患者和正常对照组PBMC培养上清中细胞因子IL．17的水平。 2．4PBMC中ROR-yt、IFN吖、IL-4mRNA表达水平 检测ROR-yt、IFN-?、IL一4 照基因。 2．5甲状腺组织中IL．17+细胞的分布和数量 应用免疫组织化学染色方法检测甲状腺组织中IL．17+细胞的分布和 数量。 2．6统计学分析： 应用SPSS 13．0统计软件，计量资料以；抽表示，两组间差异用两样本 均数的t检验进行比较。两组间采用双变量相关分析进行相关性检验，尸 O．05为差异有统计学意义。 结果： l血清TSH、FT3、FT4水平 收集的30例初发GD组患者均有血清TSH浓度降低，甲状腺激素 FT3、FT4升高，符合GD的诊断标准。 2PBMC中Thl7细胞数量变化 经抗人CD3mAb、抗人CD28mAb刺激培养24小时后，与正常对照 中文摘要 (尸O．01)。 3PBMC培养上清中IL．17水平 经抗人CD3 mAb、抗人CD28 PBMC培养上清中IL．1 7水平(80．56+40．59 pg／m1)与正常对照组 (15．05a-7．82 pg／m1)相比明显升高(氏0．01)。 4