TGF-β1诱导上皮性卵巢癌细胞发生上皮间质转化和其相关分子机制的研究.pdfVIP

中文摘要 TGF-B 1诱导上皮性卵巢癌细胞发生上皮间质转化及其相关分 子机制的研究 摘 要 ‘ 目的：卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，早期缺乏特异性症状，当 患者就诊时多数已是临床晚期，化疗耐药和术后易复发的存在使其5年生 存率仍然徘徊在30％，严重威胁妇女健康。卵巢癌的浸润和转移是影响 患者生存率的主要因素，卵巢癌发生侵袭转移是一个多因素参与的极其复 杂的过程，目前尚不了解其确切的分子机制。约90％的卵巢肿瘤起源于 surface 卵巢表面上皮(ovarian (ovarian epithelium 断、提高生存率及改善预后具有重要意义，目前对肿瘤侵袭转移机制的研 究是肿瘤研究的热点之一。 ．mesenchymal 影响，最新研究表明，经过EMT转变的癌细胞能够获得干细胞特性。EMT 是指在一定条件下有极性的上皮细胞在形态上转变成类似间质细胞，失去 极性呈分散状态，细胞骨架发生改变，同时获得间质细胞的特性能够在细 胞基质间移动，同时上皮细胞和间质细胞标志物表达发生改变。EMT最 发育、器官形成和肿瘤转移，越来越多的研究显示其在肿瘤的侵袭转移中 起着重要作用，因而已成为肿瘤研究中的热点。但对其调控机制的认识仍 然有限，因此探讨恶性肿瘤发生EMT的诱因，探寻信号转导通路和转录 因子对EMT过程的调控机制，对于寻找新的干预靶点为癌的治疗提供新 的线索具有重要意义。研究证实肿瘤微环境中多种生长因子可以诱导肿瘤 细胞发生EMT，其中TGF．131是目前备受关注诱导EMT的关键因素。 本研究通过体外培养上皮性卵巢癌细胞株，观察转化生长因子-131 Growth (Transforming 间质转化及侵袭转移的影响；同时通过研究磷酸肌醇3一激酶／丝氨酸一苏 中文摘要 l(inase protein B． P13K／Akt)信号传导途径及其下游分子蛋白水平表达变化，旨在从分子水 平上探讨TGF．B1诱导上皮性卵巢癌细胞发生EMT及侵袭转移的信号转导 机制，对深入认识卵巢癌细胞的恶性生物学行为具有重要意义，可能为预 防和治疗卵巢癌的侵袭转移提供一种新的思路和实验依据。 方法：将人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV-3、人卵巢粘液性囊腺癌 培养基中常规培养，待细胞进入对数生长期后用于实验。 在倒置相差显微镜下定时观察细胞的形态变化。 m1)作用不同时间(24h、48h)，以0ng／mlTGF．p1为对照组。采用四甲 基偶氮唑蓝(MTT)法检测TGF—Bl对细胞增殖的影响。 室上面的细胞，用甲醛固定，结晶紫染色，镜下计数穿膜细胞数，与对照 组相比较，检测细胞侵袭能力的改变。实验分组如下：@Control组：加 LY294002作用 m1)的TGF一131作用于癌细胞@LY294002组：10岬ol／ml 作用30min后加入(1 Ong／m1)的TGF．Dl。 4．Western LY294002作用于癌细胞 TGF．131作用于癌细胞@LY294002组：109mol／L ／ml的TGF一91。 5．应用SPSSl3．0统计软件进行分析。 结果： 中文摘要 1．倒置显微镜下观察SKOV-3、3AO细胞的形态学变化 细胞呈纺锤形，部分细胞伸出伪足，细胞排列较为紊乱，细胞间连接较疏 松。 2．MTT实验检测结果 生长抑制作用不明显，对照组和实验组之间差异无统计学意义(P0．05)。 3．细胞侵袭实验结果