香蕉RAPD分析初步研究.PDFVIP

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 21(3)：243— 246 2001年 8 月 香蕉RAPD分析初步研究 杜道林 ，苏 杰 ，周 鹏 ，罗素兰 ，黄秉智 ，郑学勤 (1悔南师范学院生物系，海南海 口571158；2．热带作物生物技术国家重点实验室，海南海rt57ii01 3西北农业大学园艺系，陕西西安 712100,4广东省农业科学院果树研究所，广东广州l 510640) 摘 要 ；比较了不同提取方法对香蕉植株不同部位组织提取DNA的质量及其PCR扩增结果 ，对香蕉RAPD分 析中引物种类和浓度 ，复性温度，dNTPs，TaqDNA聚合酶浓度，热循环数等因素进行了比较影响分析。结果表 明，虽然改 良的SDS法 、CTAB法和PVP法提取的植株嫩叶和吸芽 DNA提取量和纯度各不相同，但其PCR扩 增结果基车相同}相同克隆不同植株的DNA其PCR扩增结果也基本相同；建立了适台香蕉太规模 DNA多态 性分析RAPD反应体系 ：25 I反应液中，古1倍缓冲液t0．2mMdNTPst0，32pM 随机引物，IUTaq酶，20ng模 板DNA；反应循环散为 45，热循环条件为94。C，1rain{37。C，1rain；72。C，1，5rain；之前为94C，5rainf之后为 72。c，l0rain 在筛选的240个随机引物中，有 18个在 7个品种上都能扩增出3～10条比较清晰条带。 关键词 ；香蕉 ；RAPD；影响因素 中图分类号 ：Q75 文献标识码 ：A 文章编号：i000—3142(2001)03—0243—04 Preliminarystudiesontheapplication 0fRAPD inM usa DU Dao一1in ，SU Jie，ZHOU Peng，LUO Shu—lan。， HUANG Bin—zhi，ZHENG Xue—qin (1．Dei~zrtmem ofBiology，HalnanNormalCollegetHaikou571158，China}2NathmalKeyBiotechno!og2~ La~ratory TropicalCrops，CATAS，Haikou571101rChina,3．DepartmentofI-Iortivulture， Ⅳ ^∞ AgriculturalUniversity，Xian712100．China；4-P~ ology Research [nstiLuten GuangdongAcademy fAgrlcodturalSciemv．Guangzhou510640-China1 Abstract：TheeffectsoftheDNAs，extractedfrom youngleavesandbuds(orsprouts)ofMusabymodifiedSDS， PVP andCTAB methods．theprimersand theirconcentrations，theconcentrationsofdNTPs，TaqDNA poly— merase，anneahngtemperatureandtime，numberofamplifyingcycles，etc．，onRAPD analysisinMusawerestud— led．Theresultsshowedthattheamphfiedresultswerethesameonthewhole，altho