半乳糖化胆固醇配体介导的多烯紫杉醇脂质体的药物动力学及其组织分布的分析研究.pdfVIP

中文摘要中又摘要 目的： 半乳糖化胆固醇配体(5-cholesten一3 D-glucitol一6]decanedioic 催化手段合成的一种半乳糖配体。该配体能被存在于肝实质细胞上的去唾液酸糖蛋白 受体(ASGP—r)…特异性识别，可作为肝靶向给药系统的靶头用于肝靶向给药系统如 脂质体，聚合物胶束等微粒给药系统的制备。本实验室已成功制备了多烯紫杉醇脂质 体，在此工艺基础上加入该半乳糖化胆固醇配体，进一步制备得到具有肝靶向的多烯 紫杉醇配体脂质体。经质量标准考察，该配体介导的脂质体各项指标都在药典规定的 范围内。本论文旨在对该配体脂质体的大鼠体内药动学特征进行了考察并通过组织分 布研究考察了其在小鼠体内的肝靶向性效果，通过LC-MS／MS建立了血浆及组织样品 中多烯紫杉醇含量的测定方法。为新药报批及进一步非临床研究提供一定的实验基 础。 方法： 1、以紫杉醇为内标，采用LC—MS／MS法，建立血浆及组织等生物样品中多烯紫杉 醇含量测定的方法。 2、选用SD大鼠为动物模型，分别进行多烯紫杉醇配体脂质体不同剂量的药动学 低、中、高三个不同剂量的药动参数。根据不同剂量的药动学参数，选取出最适剂量， 设置多烯紫杉醇配体脂质体，多烯紫杉醇普通脂质体，多烯紫杉醇注射液三个不同制 剂组，比较三种不同制剂的药动学特征。用DAS2．．0软件绘制药动学曲线。 3、选用KM小鼠为动物模型，考察多烯紫杉醇配体脂质体在小鼠体内的的组织分 布特征。设置多烯紫杉醇配体脂质体，多烯紫杉醇普通脂质体，多烯紫杉醇注射液三 intake 240min。引入4种肝靶向参数：相对摄取率(RelativeefficiencyRe)， 靶向效率(TargetingefficiencyW。)，相对靶向效率(Relativetargeting concentraton efficiencyRT。)，峰浓度比(Peak efficiencyC。)用以衡量该制 剂的靶向性。 结果： 1、本论文成功建立了以LC—MS／MS为方法的血浆样品、组织样品中多烯紫杉醇含 量的检测。以紫杉醇为内标，其专属性、标准曲线、准确度、精密度、重复率、基质 效率等方面的考察数据表明该检测方法具有稳定性好，精密度高，准确性好、效率高 等优点。通过提取回收率的考察筛选出了血浆及组织样品处理的最佳方案。 2、大鼠单次尾静脉注射多烯紫杉醇配体脂质体2．5mg·kg～、5mg·kg～、7．5mg·kg_ 三种不同剂量后，药动学参数C。一AUC呈明显的剂量正相关性，而t眈、CL等与剂 量的相关性不显著。根据实验需要及合理性选择低剂量2．5mg·kg‘1进行多烯紫杉醇配 体脂质体、多烯紫杉醇普通脂质体、多烯紫杉醇注射液--it不同制剂的药动学结果比 平均滞留时间MRT分别为2．46±0．089，2．10±0．121，1．67±0．212。 3、小鼠单次尾静脉注射三种不同制剂后，多烯紫杉醇配体脂质体、多烯紫杉醇 22．754± 紫杉醇普通脂质体、多烯紫杉醇注射液的Te(％)分别为59．560±3．01l 0．804．12．349±0．338。 结论： 1、本论文采用LC-MS／MS测定血浆及组织样本中多烯紫杉醇的含量，该方法操作 简单方便，灵敏度高，专属性强，重现性好，效率高，节约环保，为该课题的进一步 研究提供了有效地检测方法。 2、大鼠不同剂量的药动学参数表明多烯紫杉醇配体脂质体在大鼠体内药动学过 程基本符合二室模型，高剂量时其参数AUC与C。，呈明显剂量相关性，而t班、CL等 与剂量的相关性不显著，表明配体脂质体在大鼠体内未出现非线性药动学特征。与多 烯紫杉醇注射液及多西紫杉醇普通脂质体相比其tm。、MRT、V。均降低，CL升高， 表明经半乳糖配体修饰后，脂质体在大鼠体内分布速率加快，滞留时间变短，分布范 围变窄，在血液中的清除速度加快，推测可能与肝对其的高摄取率有关。 3、小鼠给药多烯紫杉醇配体脂质体后，以单位组织中多烯紫杉醇含量计算，药 物在小鼠组织中的分布顺序分别为：肝肺脾。肾心。与多烯紫杉醇普通脂质体相比， 多烯紫杉醇肝靶向配体脂质体在肝脏的靶