非甾体类抗炎药活化基因-1在胃癌中的表达和其真核表达载体的构建.pdfVIP

硕士研究生论文 非甾体类抗炎药活化基因．1在胃癌中的表达及其真核 表达载体的构建 摘 要 目的： 1．研究非甾体类抗炎药活化基因一1(nonsteroidalanti—inflammatorydrug —activated gene-1，NAG-I)在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理特征之 间的关系，探讨NAG一1在胃癌发生、发展和侵袭中的作用。 建立实验基础。 方法： 1．采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测76例原发性胃癌患者癌 组织及相应胃正常黏膜组织中NAG-ImRNA的表达； 2．采用免疫组织化学S-P方法检测胃癌及正常胃粘膜组织中NAG-I蛋白的表达 情况； 片段插入表达载体pEGFP-N1中，并通过蓝白斑实验、酶切、PCR和DNA测序 刷选和鉴定阳性克隆。 结果： 1．正常组织和胃癌组织中均表达NAG-ImRNA，胃癌组织中的相对含量为0．5563 胃癌组织的0．4005±0．1859(p0．05)。不同浸润深度、有无淋巴结转移、 不同临床分期的胃癌组织间NAG—ImRNA相对含量的差异均无统计学意义 (p0．05)。 2．胃癌组织的NAG一1蛋白的表达程度显著于低于胃正常粘膜组织(X2=47．186， 4 硕+研究生论文 移、不同临床分期的胃癌组织间NAG—l蛋白表达程度的差异均无统计学意义 (p值0．05)。 3．对阳性克隆进行PER、酶切及DNA测序鉴定，证实NAG一1目的片段已正确插入 表达载体。 结论： 1．NAG．1mRNA在胃癌组织中的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期无 关，而与肿瘤的分化程度相关，提示NAG．1mRNA的表达程度影响胃癌的分 化。 2．NAG．1蛋白的表达与肿瘤分化程度相关，NAG．1蛋白质在胃癌组织中的表达 与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期无关，提示NAG．1蛋白质的表达可能 影响胃癌的分化。 3．NAG．1mRNA在胃癌组织低于正常胃组织中的表达，NAG．1蛋白在胃癌组织 中的表达明显低于它们在正常胃组织中的表达，提示NAG．1的表达改变可能 与胃癌发生与发展有关。 实验基础。 关键词： 非甾体抗炎药活化基因．1；胃癌；逆转录．聚合酶链反应；免疫组织化学；质粒 硕士研究生论文 ofnonsteroidal Expression anti-inflammatorydrug·-activatedgene·-1 inhuman cancertissueanditsConstructionof gastric Eukaryotic Vector Expression [Ohjective】： 1．To the ofnonsteroidal studyexpression anti-inflammatorydrug-activatedgene-1 inhuman cancerandits withtheclinical gastric relationship metastasisof cancer． degree，andlymphatic gastric 2．Toclonea ofNAG-1intoan vector 1 for fragment gene expressionpEGFP-N NAG一1 invit