三氧化二砷对人乳腺癌雌激素受体表达的作用.pdfVIP

摘要 三氧化二砷对人乳腺癌雌激素受体表达的影响 研究生：杨建华 导师：王留兴 郑州大学第一附属医院肿瘤科 河南郑州450052 摘要 背景和目的： 近年来乳腺癌的发病率和死亡率增长速度较快，全世界每年患乳腺癌的女 性约130万人，而死于乳腺癌的有50万人。虽然我国的乳腺癌属于低发，但近年 来其发病率增长幅度较快，预N20年后将会成为我国发病率最高的恶性肿瘤。 ER)在乳腺癌的发生发展过程中，扮演着重 雌激素受体(estrogenreceptor 要角色。在体内通过与雌激素的结合，激活含雌激素应答元件基因和含有其他 转录因子结合元件基因的表达，进而导致乳腺癌的发生。通常情况下，以ER基 因表达情况的不同可将乳腺癌分为ER阴性乳腺癌和ER阳性乳腺癌两种。其中ER 阴性乳腺癌约占20‰35％，其恶性程度高、发展迅速、有较高的局部复发率， 并易发生肺、肝、骨及脑等重要脏器的转移，预后较差。由于缺乏相应的受体 不能进行内分泌和生物治疗，所以这类特殊乳腺癌的治疗仅限于化疗，但疗效 欠佳。因此，作为一个分子标记物，ER在乳腺癌的内分泌治疗中进行效果预测、 评估激素依赖性等方面具有重要的意义。 DNA甲基化和染色体重组是当前研究ER阴性乳腺癌中ER基因失活的两大 主要学说。甲基化在肿瘤的发生、发展中有着重要作用，但又是一可逆过程。 从理论上来说，如果使用药物对甲基化的抑癌基因和癌基因进行人为逆转，即 可使因甲基化失活的基因重新获得表达。 三氧化二砷(As203)为中药砒霜的主要成分，近年来发现其对白血病、原 摘要 发性肝癌等多种肿瘤治疗取得了较好的效果。主要通过诱导细胞凋亡来发挥其 细胞毒性作用，如今多项研究证明其具有甲基化抑制作用。 进行药物诱导，使其基因启动子区CpG岛部分脱甲基而使其重新表达有功能的 ERa，从而使得ER阴性乳腺癌细胞恢复对内分泌治疗药物的敏感性。 材料与方法： 照。 mRNA表达情况。 PCR，MSP)方法检测经不同 (3)甲基化特异性PCR(MethylationSpecific 浓度As203处理后的MDA．MB-435细胞ERaDNA的5-CpG岛甲基化的情况。 (4)Western ERa的蛋白表达情况。 的蛋白表达情况。 ． 苯氧胺(TAM)处理，观察各组细胞的生长受抑情况。 (7)统计学方法：应用统计学处理软件SPSS16．0，X?检验进行统计学分 析，差异显著性标准设为P0．05。 结果： (1)RT-PCR法检测阴性对照组无ERa mRNA基因；O．5ttrnol／L组未扩增出 ERa mRNA 基因。 (2)甲基化特异性PCR法检测阴性对照组仅甲基化引物扩增出特异PCR Ⅱ 摘要 基化引物均扩增出特异PCR条带。 (4)经免疫组化法检测证实阴性对照组细胞阳性率为7．4％；0．5lxmol／L组、 78．2％、41．5％。 ／L组、4．0}tmol／L组细胞受抑率分别是14．9％、30．7％、43．1％、56．6％。 结论： 适当浓度的As203通过对部分细胞的去甲基化作用，使ERa阴性人乳腺癌 细胞株MDA．MB．435细胞ERamRNA和蛋白重新表达，并可恢复对内分泌治 疗药物(--苯氧胺)的敏感性，从而为ERa阴性乳腺癌患者实现内分泌治疗提 供可靠的理论依据。 【关键词】．三氧化二砷；乳腺肿瘤：MDA-MB-435细胞：雌激素受