利用多重荧光定量PCR产前快速诊断胎儿非整倍体的探究.pdfVIP

目 录 中文摘要 ……3 Ab s tr a c t ……，……3 前 言……6 第一部分 多重 荧光 STR 新位 点在 50 例无 关个体 中的研 究……9 材 料 和 方 法 ……9 结 果 ……12 讨 论 ……巧 第二部分 ST R 新位 点在 13 、18 、21 三体 综合征 中的研 究…… 17 材 料 和 方 法 ……17 结 果 ……，……19 讨 论 ……21 第三部分 多重荧光定量 PC R 在产前诊 断胎 儿唐 氏综合征 中的应用 ……24 材 料 和 方 法 ……24 结 果 ……27 讨 论 ……，……_……，…甲……30 参考 文献 ……，……犯 综 述 ……37 致 谢 ……45 利用 多重 荧光定量 Pc R 产前快速诊 断胎 )L非整倍 体 的研 究 中文摘 要 将 PCR 技 术 运 用 在 产 前 诊 断领 域 迄 今 己近 20 年 了 ，随着 技 术 的推 广 和 使 用 范 围 的增 加 ，其 有 效 性 及 高 效性 逐 步 获 得 大 家 的认 同，甚至 有 取 代 细 胞 学 核 型 分 析 的趋 势 。通 常 ，PCR 可 在 获 取 羊 水 、绒 毛 或 胎 儿 组 织标 本 后 的 24一36 小 时 即获 得 诊 断报 告 ，若 胎 儿 正 常 可 缓 解 孕 妇 及 家庭 的焦 虑 ，若 胎 儿 有 染 色 体 异 常 可 即 时 终 止 。 国 内也有 较 多学 者 从 事 使 用 PCR 产 前 诊 断胎 儿 非 整 体 的研 究 ，但 在 STR 位 点 的选 择 及 使 用 数 目等 方 面 的研 究 却 不 多 ，本 文 从 STR 新位 点在 正 常无 关 个 体 外 周 血.中 的杂 合 度 及 多肤 信 息含 量入 手 ，建 立 ST R一PC R 的实验 方 法 。使 用 多种 STR 位 点组 合 在 13 、18 、21 号 染 色 体 异 常 的标 本 中探 索有 效 的组 合 方 式 ，最 后 ， 设 计两 种 探 针 组 合 在 产 前 孕 中期 羊 水 中检 测 21 号 染 色 体 的数 目，并 和 细 胞 核 型 学 分 析 结 果 比较 ，计 算 STR一PCR 方 法 在 产 前 诊 断 中 的检 出率 ，为 临床 进 行 多种 新 研 究 建 立 可 行 的方 法 学平 台 。 第一部分 多重荧光 ST R 新位 点在 50 例无关个体 中的研 究 目的 应用 13、18 、21号染色体上 17 个 sTR 新位点 (D13s796、D13ssoo 、 D 13 5 8 8 6 、 D 18 5 8 7 7 、 D 18 5 8 5 1 、 D 18 5 8 4 7 、 D 18 5 8 19 、 D 2 1S l lL 、 D Z IS 14 O g 、 D Z 15 18 0 9 、 D 2 15 2 O 5 2 、 D 2 1S 19 9 4 、 D Z IS 14 4 6 、 I)2 15 14 3 5 、 D 2 15 1 1 、 、DZ 15 14 32 、I)2 15 1442 )， 了解 新 位 点在 诊 断 染 色 体 数 目中的应 用 价 值 。 方 法 在50 例正常人血清标本中通过 lcl之扩增基因测序的方法 ，用 sPsslZ.o 软 件 直 接 计算 新位 点杂合 度 (I)l 和 多肤 信 息 含 量 (曰C) ，并对 13 、18 、21 染 色 体 数 目进 行 诊 断 。 结果 13 号染色体中s一’12位点一0.6一0.7J，尸zc 0.65一0.7。18 号染色体中sTR 位 点 H 0.69一0.8 1，尸jC 0.68一0.8 。2 1 号染 色 体 中 5 1’R 位 点 11 0 .7一0.8 7 ， I，]C 0.63一0.8准。2 1、 13 、 18 染色 体 ，二飞倍 体 检 出率 为 100% 。 结论 sI’1·2新位点杂合度和信息含最高，可在幽析 13、18、21 染色体数 目中 被 应 用 。 关键 词 荧光 定最