利用体外细胞共培养模型探究子宫内膜异位症的血管生成.pdfVIP

利用体外细胞共培养模型 研究子宫内膜异位症的血管生成 摘要 研究目的 1、 建立子宫内膜异位症子宫内膜基质细胞(ESC)、脐带静脉血管内皮细胞 (HUVEC)体外共培养模型。 2、应用该模型，观察内异症患者(研究组em)及非内异症患者(对照组con) ESC与HUVEC共培养后，细胞运动、迁移的微观行为，比较细胞共培养后行 为的差异。 与HUVEC共培养后HUVEC细胞运动的影响。 方法 l、取组织分离培养原代ESC和HUVEC 2、设计制备二甲基硅氧烷(PDMS)ffO章 3、利用双孔道同时接种同一种细胞，进行愈合实验分别观察ESC、HUVEC生长 速度的差异。 组共培养体系中HUVEC生长差异。 5、用含有不同浓度E、P0、VEGF的培养基培养共培养体系，并免疫荧光标记， 24小时拍照，比较两组共培养体系中HUVEC生长差异。 结果 106／1时在孔道内生长良好，2小时可贴壁牢固，揭膜后图案化好。 愈合(em及con无明显差异)； 3、ESC与HUVEC共培养后，HUVEC条带靠近ESC一侧细胞密度高。 (Po．05)；ESCem_HI HUVEC生长速度快(P0．05)。 5、ESC．印ⅣEC共培养体系中， 度与HUVEC生长成正相关(P0．05)； 浓度与HUVEC生长成负相关(P0．05)； 3)VEGF 生长成正相关(P0．05)； 4)p雌二醇浓度为0．2nmol／l，有抑制HUVEC生长现象(PO．05)。 结论： 1、成功建立了子宫内膜异位症体外血管生成的细胞共培养模型，模型较为稳定， 可操作性强； 2、通过共培养模型的研究，子宫内膜基质细胞对脐带静脉血管内皮细胞的生长有 诱导作用；研究组的诱导作用强于对照组； 3、共培养体系中，高浓度p雌二醇、血管内皮生长因子促进脐带静脉血管内皮细 胞生长、高浓度孕酮浓度为抑制脐带静脉血管内皮细胞生长；低浓度D雌二醇 抑制脐带静脉血管内皮细胞生长。 关键词：子宫内膜异位症、血管生成、细胞共培养、体外模型 in The of ofendometriosis investigation angiogenesis vitrocellcoculturemodel Abstract ective Obj anin l、ToestablishvitroCO·culturemodelofendometrialstromal Humanumbilicalveinendothelial cells(HUVECs)． 2、 this observecellmovementand ofESCandHUVEC Usingmodel,to migration from to the endometriosis(em)and compare differenceofcellbehaviorscellco-cultured． during 3、To the oncell investigateimpact growth andVascularendothelial cellCo—culture． factor(VEGF)during