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一起因多种致病菌污染引发食物中毒实验诊断及研究[摘要]目的：一起食物中毒的实验室调查分析。方法：采集病人肛拭8份、熟食砧板涂抹物2份，熟食菜刀涂抹物2份，操作台面涂抹物1份，熟食冰箱内壁涂抹物1份，剩菜3份，共17份样品进行检测。结果：8份肛拭中，检出3份副溶血性弧菌，其中1份肛拭同时检出奇异变形杆菌和河弧菌；1份熟食菜刀涂抹物中检出奇异变形杆菌；1份剩菜中同时检出副溶血性弧菌、奇异变形杆菌和溶藻弧菌。结论：本次食物中毒为致病性弧菌和奇异变形杆菌引起的食物中毒。 [关键词]致病菌；食物中毒；致病性弧菌；奇异变形杆菌 2011年5月12日9时，我中心接市民举报，称其在某便民餐厅举办丧宴后多名客人先后出现腹痛、腹泻等症状，疑似发生食物中毒。接报后，我中心立即组织专业人员赴现场进行调查。经流行病学调查、临床资料分析和实验室检验，诊断为致病性弧菌和奇异变形杆菌引起的食物中毒。现将结果报告如下： 1流行病学调查 1.1基本情况 2011年5月11日市民孙某在本市某便民餐厅举办丧宴，中餐共14桌约140人，晚餐6桌共58人，中、晚餐菜谱相同。剩菜打包回家。自5月11日晚上8时起陆续有多人先后出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状。发病人数为8人，年龄在25～67岁之间。 1.2临床表现 中毒病例临床症状相似，全部出现腹痛、腹泻等主要症状，腹痛以上腹部和脐周阵发性绞痛为主，腹泻为黄色水样便，腹泻次数4～13次不等，平均6次/天?人，部分病人出现恶心、呕吐和发热体征。 2材料与方法 2.1样品采集 患者肛拭8份，熟食砧板涂抹物2份，熟食菜刀涂抹物2份，操作台面涂抹物1份，熟食冰箱内壁涂抹物1份，剩菜3份，共17份。 2.2检验项目 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、副溶血性弧菌、溶藻性弧菌、致泻性大肠埃希氏菌 2.3检验依据 《食品卫生微生物学检验》GB/4789-2003GB/T4789-2008、《变形杆菌食物中毒诊断诊断标准及处理原则》（附录A）WS/T9-1996、《感染性腹泻诊断标准》WS271-2007、《全国临床检验操作规程》（第三版）。 2.4试剂来源 增菌、分离培养基购于杭州天和微生物试剂有限公司；微量生化管购于北京陆桥技术有限公司；血平板购于上海科玛嘉。以上试剂均在有效期内使用。盐耐量试验管为自备。 3实验室病原菌检验 3.1分离培养 17份样品到达实验室后采用直接平板分离和增菌培养二步检测。直接平板划种WS平板、SS平板、EMS平板、血平板、TCBS平板、4号平板；增菌培养为：SC增菌液、7.5%Nacl肉汤增菌液、肠道增菌肉汤、GN肉汤（6小时和24小时两次划种SS平板）、碱性蛋白胨水，分别接种WS平板、血平板、EMB平板、SS平板、TCBS平板和4号平板。以上增菌液及分离平板不注明培养温度时间的均为36℃24小时。经分离培养后观察不同平板上菌落生长特性，接种双糖，根据双糖和平板上菌落生长情况排除沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、致泻性大肠埃希氏菌。 3.2检验结果 采集的样品中3份肛拭和1份剩菜均检出副溶血性弧菌，其中又在1份肛拭和1份剩菜中同时检出奇异变形杆菌，另外在1份肛拭和1份熟食菜刀涂抹物中检出奇异变形杆菌。另在1份肛拭中检出河弧菌，1份剩菜中检出溶藻弧菌。 3.2.1副溶血性弧菌在TCBS平板上呈绿色，不发酵蔗糖，圆形隆起，湿润光滑，边缘整齐的菌落。革兰染色镜检为革兰阴性、两端浓染、无芽孢、无荚膜微弯曲弧菌。挑取典型菌落做氧化酶试验结果为阳性。重点生化反应：葡萄糖+、乳糖-、蔗糖-、甘露醇+、动力+、尿素-、赖氨酸+、鸟氨酸+、精氨酸-、靛基质+、阿拉伯糖+。嗜盐性生长试验结果：无盐胨水-、3%Nacl胨水+、6%Nacl胨水+、8%Nacl胨水+、10%Nacl胨水-。 3.2.2变形杆菌在SS平板上呈扁圆形，半透明，中心黑色，湿润，中等大小的菌落。革兰染色镜检为革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜。生化反应：葡萄糖产酸产气、乳糖-、H2S+、苯丙氨酸+、尿素酶+、赖氨酸-、鸟氨酸+、靛基质-、水杨苷-、MR-、VP-、枸橼酸盐-、麦芽糖-、木糖+。 3.2.3河弧菌在TCBS平板上呈黄色，发酵蔗糖，湿润，中等大小的菌落。革兰染色镜检为革兰阴性微弯曲弧菌，无芽孢、无荚膜。挑取典型菌落做氧化酶试验结果为阳性。重点生化反应：葡萄糖+、乳糖-、蔗糖+、甘露醇+、动力+、尿素-、赖氨酸-、鸟氨酸-、精氨酸+、靛基质-、阿拉伯糖+。嗜盐性生长试验结果：无盐胨水-、3%Nacl胨水+、6%Nacl胨水+、8%Nacl胨水-、10%Nacl胨水-。 3.2.4溶藻弧菌在T