家族性肌萎缩索硬化动物模型腰段脊髓泛素表达特征.pdfVIP

ffI|JIIJIfIIrlflIlffJI II rfll I I rll 』Y1 901199 目 录 中文摘要……………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………………4 研究论文家族性肌萎缩侧索硬化动物模型腰段脊髓泛素表达特征 前言………………………………………………………………………………………………一8丹IJ吾………………………………………………………………………………………………………………………………8 材料与方法……………………………………………………………………8 结果……………………………………………………………………………………………．18 附图…………………………………………………………………………．20 附表………………………………………………………………………………………．．25 讨论………………………^……………………………………………………………………26 结论……………………………………………………………………………………………．29 参考文献……………………………………………………………………29 综述肌萎缩侧索硬化相关的胞浆包涵体…………………………………．．33 致谢……………………………………………………………………………………………………46 个人简历…………………………………………………………………………．47 中文摘要 家族性肌萎缩侧索硬化动物模型腰段脊髓泛素表达特征 摘 要 lateral 目的：肌萎缩侧索硬化(amyotrophic 进行性加重的神经系统变性疾病，选择性损害脊髓前角的运动神经元、脑 干运动神经核运动神经元及大脑运动皮层的大锥体细胞，表现为进行性加 重的肌肉无力、肌肉萎缩、肌束震颤、腱反射亢进，病理征阳性，最终呼 目前该病发病机制尚不清楚，但残存运动神经元中存在泛素阳性包涵体是 ALS的重要病理特征之一。 泛素是真核细胞中普遍存在且序列高度保守的小分子球形蛋白质，其 分子量约8．5KDa，由76个氨基酸残基组成，能够共价结合细胞中的受 体蛋白。泛素与泛素活化酶El、泛素结合酶E2、泛素连接酶E3、去泛素 化酶、蛋白酶体及其底物(蛋白质)构成泛素一蛋白酶体系统 (ubiquitin．proteasome 径，参与细胞内80％以上蛋白质的降解。大量研究认为UPS在错误折叠 蛋白或其他突变蛋白的降解过程中也发挥重要作用。泛素蛋白酶体降解通 路失调可导致异常蛋白在细胞内积聚，并进一步引起细胞功能紊乱及变 性。UPS功能异常可以发生于UPS途径的任何一个环节，如泛素化过程 中泛素量的失衡，泛素结合过程中泛素活化酶El，泛素结合酶E2，泛素 连接酶E3功能失调，蛋白酶体降解水平失调或去泛素化水平失调等。实 验表明，在ALS包涵体中所见的泛素连接酶Dorfm能特异性结合并泛素 包涵体的形成，从而保护神经元免受SODl毒性的损害。因此，泛素蛋白 酶体降解系统和ALS的发病可能存在密切关系。 本实验应用家族性肌萎缩侧索硬化动物模型(SODlG93A转基因小鼠) 观察泛素在ALS病程不同阶段的表达情况，旨在探讨泛素蛋白在ALS的 发病中的作用。 方法：饲养繁殖家族性肌萎缩侧索硬化动物模型SODlG93A转基因小 中文摘要 症状早期，终末期。对照组动物为实验组小鼠同窝非转人突变SODl基因 小鼠。 1 10％水合氯醛350mg／kg腹腔注射麻醉后，心脏