帕金森病家系GDNF基因启动子测序和其CpG岛甲基化分析.pdfVIP

徐州医学院硕士学位论丈 缩略词表 Abbreviation 缩略词 英文全称 中文全称 COBRACombinedwith restrictive结合亚硫酸盐限制性分析 sulphite analysis 5’to 磷酸胞苷酰 CpG Cytosinespositionedguaosines DA Dopamine 多巴胺 cell GDNF The line-derived glial neurotrophic胶质细胞源性神经营养因 factor 子 MSP PCR 甲基化特异性PCR Methylationspecific MS．SNuPE sensitive 甲基化敏感的单核苷酸引 Methylationsingle—nucleotide extensionmethod 物延伸法 primer NTFs factors 。神经营养因子 Neurotrophic PCR chainreaction 聚合酶链反应 Polymerase PD Parkinson’Sdisease 帕金森病 RLGS Restrictivemarker scan 限制性标记基因组手1描 genome-wide SNPs nucleotide 单核苷酸多态性 Single polymorphisms 徐州医学院硕士学位论丈 帕金森病家系GDNF基因启动子测序及其 CpG岛甲基化分析 中文摘要 目的探讨GDNF基因启动子的变异或其CpG岛的异常甲基化与PD家系中 PD发病的关系。 方法从PD家系成员的外周血中提取全血DNA，应用引物设计软件针对第 一启动子设计2对引物和3组甲基化和非甲基化引物，第二启动子区及第二外显 子区设计l对引物和4组甲基化和非甲基化引物：应用聚合酶链反应(PCR)进行 GDNF基因2个启动子扩增，并用基因测序技术进行测序，然后应用DNAstar软 件进行序列变异分析。采用甲基化特异性PCR(MSP)技术扩增2个启动子区及 第二外显子区的甲基化和非甲基化产物，并用琼脂糖凝胶电泳观察GDNF基因2 个启动子区及第二外裎子区CpG岛的甲基化情况。 结果GDNF基因第一个启动子区发现了2个变异位点，是目前已知的多态 位于转录结合区；而第二个启动子区未发现变异。GDNF基因2个启动子区及第 二外显子区的CpG岛上无异常甲基化。 结论 1．PD家系中PD的发病町能与GDNF基因第一启动子区的2个多态 位点有关。2．PD家系中PD的发病与GDNF基因启动子突变无关。3．PD家系 中PD的发病与GDNF基因CpG岛的异常甲基化无关。 关键词 帕金森病；胶质细胞源性神经营养因子；DNA甲基化；甲基化特异性 PCR 2 徐州医学院硕士学位