拉米夫定对人乙肝病毒相关肝癌细胞放射敏感性的影响和机制研究.pdfVIP

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2017-09-06 发布于贵州
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拉米夫定对人乙肝病毒相关肝癌细胞放射敏感性的影响和机制研究.pdf

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拉米夫定对人乙肝病毒相关肝癌细胞放射敏感性的影响和机制研究

摘要摘要目的：研究抗病毒剂拉米夫定对人乙肝病毒相关肝癌细胞株HepG2．2．15细胞的放射增敏作用，并初步探索其可能的增敏机制。方法：人乙肝病毒相关肝癌HepG2．2．15细胞的病毒抑制效果；采用平板克隆形成实验观察拉米夫定对HepG2．2．15细胞株放射敏感性的影响；运用流式细胞仪检测 HepG2．2．15细胞的凋亡率及细胞周期分布变化；利用RT．PCR法、细胞免疫组结果：荧光定量PCR法检测结果显示，拉米夫定可抑制HepG2．2．15细胞内乙肝病毒的复制，且在1099／mL作用48h时抑制效果最佳；平板克隆形成实验显示拉米夫定可显著降低照射后HepG2．2．15细胞的克隆形成率，其放射增敏比(SER) 为1．224；流式细胞仪检测显示拉米夫定联合照射作用HepG2．2．15细胞后表现为凋亡率增加，GO／G1期细胞比例增多p0．05)；拉米夫定联合照射后，细胞内 CyclinDlmRNA及CyclinDl蛋白的表达水平均下调。结论：抗病毒剂拉米夫定在体外抑制乙肝病毒复制的同时能增强HepG2．2．15细胞的放射增敏感性，其增敏机制可能与拉米夫定下调CyclinDl表达引起GO／G1期阻滞及增强放射诱导的细胞凋亡有关。关键词：HepG2．2．15细胞；拉米夫定；CyclinDl；辐射耐受性 Abstract ABSTRACT Objective： antiviral lamivudinein the To theeffectof agent enhancing explore line virus-related carcinomacell ofhuman B hepatocellular radiosensitivityhepatitis 5 celland the radiosensitizing HepG2．2．1 preliminarilyinvestigatepossible mechanisms． Methods： PCR fordetectionofvirus effectof Fluorescent assay inhibitory quantitative Bvirus-related carcinoma hepatitis hepatocellular lamivudine(0，2．5，5，10，25I．tg／mL)in 5 influenceoflamivudineonthe of 5 cells；The radiosensitivityHepG2．2．1 HepG2．2．1 and in weredetected formation rate cells bycolony assay；Theapoptosis change cell of 5cellswereexaminedflow cycleHepG2．2．1 by cytometry；RT-PCR，Ce