来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎防治作用的探究.pdfVIP

目 录 1 来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎防治作用的研究 1 1.1 中文摘要 1 1.2 英文摘要6 1.3 前言 12 1.4 材料与方法 15 1.5 结果24 1.6 讨论42 1.7 结论55 1.8 参考文献56 1.9 英汉缩略词对照表68 1.10 附图70 2 致谢72 3 认知功能障碍心理学评估量表与多发性硬化（综述） 73 4 攻读硕士学位期间发表文章84 来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎防治作用的研究 摘 要 目的：观察来氟米特（LEF ）对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE ） 的防治作用。探讨LEF 对EAE 防治作用的免疫学机制。方法：将60 只雌性Wistar 大鼠随机分成5 组：空白对照组、EAE 对照组及小、 中、大剂量LEF 防治组，每组12 只。使用粗制髓鞘碱性蛋白（MBP ） 及完全弗氏佐剂制成免疫抗原，皮下注射制作 EAE 模型，空白对照 组仅注射等量完全弗氏佐剂。自造模之日前三天起，小、中、大剂量 LEF 防治组分别予以LEF0.5mg/kg/d 、2mg/kg/d 、8mg/kg/d 灌胃，空 白对照组及EAE 对照组每日以生理盐水2ml 灌胃，连续10 天。记录 Wistar 大鼠发病率、发病潜伏期、进展期及发病高峰期神经功能障碍 评分。在发病高峰期时处死大鼠，未发病及空白对照组4 周后处死。 留取大鼠脑脊髓组织、胸腺及眶静脉血。大鼠脑脊髓组织处理后做 HE 染色，通过酶联免疫吸附法（ELISA ）测定外周血单个核细胞 （PBMC ）分泌IL-4 及 IFN- γ水平，通过放射免疫法检测脑组织细 胞因子IL-2 、IL-6、TNF- α含量，通过流式细胞仪测定外周血T 细胞 亚群分布以及胸腺细胞凋亡率。结果：（1）Wistar 大鼠发病情况：空 白对照组大鼠未发病；EAE 对照组发病率 100％；小、中、大剂量 LEF 防治组部分动物发病，发病率分别为83.33 ％、66.67 ％、58.33 ％。 EAE 对照组发病潜伏期11.00±1.28 天，小、中、大剂量LEF 防治组 1 发病潜伏期分别为17.10±0.88 天、20.63 ±1.06 天、22.71 ±0.95 天， LEF 各防治组发病潜伏期均比 EAE 对照组长（P ＜0.01 ），剂量依赖 关系明显。EAE 对照组发病进展期 6.83 ±0.72 天，小、中、大剂量 LEF 防治组发病进展期分别为5.20 ±0.79 天、4.00 ±0.76 天、3.00 ± 0.82 天，LEF 各防治组发病进展期均比EAE 对照组缩短（P ＜0.01 ）， 呈剂量依赖关系。EAE 对照组发病高峰期神经功能障碍评分为 4.00 ±1.54 分，小、中、大剂量 LEF 防治组发病高峰期神经功能障碍评 分为2.67 ±1.83、1.83±1.80 分、1.17±1.34 分，大、中剂量LEF 防 治组发病高峰期神经功能障碍评分较EAE 对照组评分低（P ＜0.01 ）， 小剂量LEF 防治组与EAE 对照组相比差异不具有统计学意义（P ＞ 0.05 ）；大剂量 LEF 防治组发病高峰期神经功能障碍评分较小剂量 LEF 防治组低，差异具有统计学意义（P ＜0.05 ），中剂量LEF 防治组 发病高峰期神经功能障碍评分较小剂量 LEF 防治组低，差异无统计 学意义（P ＞0.05 ）；大剂量LEF 防治组发病高峰期神经功能障碍评分 较中剂量LEF 防治组低，但差异不具有统计学意义（P ＞0.05 ）。（2 ） EAE 对照组及小、中、大剂量LEF 防治组Wistar 大鼠脑及脊髓病理 学改变情况：空白对照组大鼠脑组织无异常。EAE 对照组及LEF 各 防治组大鼠脑组织实质内血管周围有大量炎性细胞浸润，其中以淋巴 细胞浸润为主同时伴有少量的单核细胞，典型者形成“袖套”样的改 变。LEF 各防治组炎性细胞浸润严重程度与EAE 对照组相比病理改 变减轻，且剂量越大减轻程度越明显。（3 ）LEF 对EAE 大鼠发病高 峰期脑组织中 IL-2 、IL-6、TNF- α含量的影响：EAE 对照