热休克预处理对人晶状体上皮细胞HSP6mRNA表达的影响和意义.pdfVIP

摘要 摘要 目的 采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR方法检测人晶状体上皮细胞在不同环 及不同环境刺激处理后表达是否有差异。 方法 采用正常人组织源性晶状体上皮细胞HUM．CELL．0098进行细胞传代培养 后，将传代培养后的细胞进行分组实验，在氧化条件以及热休克处理后加氧化 条件下培养细胞30min后，在正常培养条件下继续培养并且选取不同时间点(0h、 Green 2h、4h、6h、16h、24h)的细胞采用SYBRI实时荧光定量PCR检测 HSP60mRNA的表达情况。 结果 观察到晶状体上皮细胞在不同环境刺激下均表达HSP60mRNA，但热休克预 处理后的细胞HSP60mRNA的表达较未热休克处理细胞高。氧化应激条件下 HSP60mRNA的表达明显增加，在刺激结束后表达含量为最高，以后逐渐下降； 在热休克预处理组中HSP60mRNA的表达含量也明显增加，但在4h表达量最高， 以后逐渐下降。两组细胞在不同时段HSP60mRNA表达量变化趋势不同 化应激组中HSP60mRNA表达含量有显著差异，热休克处理组的表达含量较单 表达量进行各个时间两两对比发现这两组数据在统计学上有差异。此外，还发 现热休克处理后的细胞表达HSP60mRNA可能具有时间依赖性。 结论 人晶状体上皮细胞在不同应激条件下，均能诱导HSP60mRNA的合成，但 在不同应激条件下的HSP60mRNA的表达是具有差异的，热休克预处理后的细 胞HSP60mRNA的表达高于氧化损伤处理的细胞，给予预先的热休克处理可通 过提高HSP60mRNA表达来保护晶状体。 II 摘要 Green 关键词：晶状体上皮细胞；热休克蛋白60；热休克预处理；SYBRI；实 时荧光定量PCR 11I Abstract ABSTRACT Objective SYBRGreenI real-time Adopt chain quantitativepolymerase reaction(PCR) to the ofHSP60mRNA testing ofhumanlens cellsin investigateexpression epithelial different environmental the ruleofHSP60 stimuli，discusseschange expressquantity andthe ofHSP60mRNAindifferent expression environmentwhetherisdifferent． Methods Humanlens cellsHUM-CELL．0098were epithelial andthendivided training into were intheoxi