热化疗对小鼠移植性S180肉瘤细胞凋亡、增殖和血管再生的影响和其机制研究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文热化疗对小鼠移植性S180肉瘤细胞凋亡、增殖及血管 再生的影响及其机制研究 前言“·…一···“·一“”一”一””“一”“一””“”””“一””””””一一一·8刚看“””～一”“一“”～”“”””“”””””一”””““”””””“一”一。芍 材料与方法…………………………………………………………9 结果……···················“…····“““““““一一””一一．．”一“一“”·15 附图、附表…………………………………………………………17 讨论·······································-·······················“··“”·“·29 结论································································“”一”．．·33 参考文献……………………………………………………………35 综述热、化疗联合治疗消化系统肿瘤的机制与临床研究…………42 OOOOOQ000OOO00…………………………………………………53 致谢………I 个人简历…………………………………………………………………54 中文摘要 热化疗对小鼠移植性S啪肉瘤细胞凋亡、增殖 及血管再生的影响及其机制研究 摘 要 细胞周期分布、微循环产生作用，热疗还会诱导细胞凋亡、抑制肿瘤的侵 袭转移，另外，热疗还可提高机体免疫功能。因此，热疗做为一种重要的 肿瘤辅助性治疗手段，临床上常与其他常规治疗方法联合应用，以期提高 肿瘤的治疗效果。但目前与肿瘤热疗相关的基础和临床资料均有待于更加 深入和充分的研究，某些关键技术环节尚未取得突破，因此目前肿瘤热疗 的巨大潜能尚未得到充分开发与应用。本研究拟通过S180荷瘤小鼠动物模 型，经热疗、化疗单独或联合处理后，测量各组平均瘤重，计算抑瘤率， 测定肿瘤细胞凋亡率和细胞周期以及S180移植瘤组织内的增殖细胞核抗 cellnuclear 原(proliferating endothelial growth 单独及联合应用对小鼠移植性S180肉瘤的凋亡、增殖及血管再生的影响， 并初步探讨其可能的作用机制。 方法：1、实验用昆明小鼠60只，右后肢股部皮下接种S180肿瘤细胞 株，随机分为空白对照组、热疗组、化疗组、热化疗组。当肿瘤生长至lcm3 时分组进行局部热疗、化疗和热化疗。给化疗组和热化疗组小鼠腹腔注射 平阳霉素0．2mg／只，热化疗组小鼠给药30分钟后立即对荷瘤的右后肢给 予43±0．20C恒温水浴加热1小时。然后热疗组给予同样加热处理。各实 验组在给予第一次治疗后每隔3天，重复治疗一次。于第三次治疗后24 小时，将小鼠颈椎脱臼处死，于小鼠后肢同一水平面离断其荷瘤下肢，瘤 体称重，计算抑瘤率。离体标本用生理盐水冲洗3次，迅速将肿瘤组织切 成多个小块，部分置于70％乙醇4℃固定保存，以备流式细胞分析使用： 部分置于10％中性甲醛固定室温保存，以备免疫组织化学染色使用；部 定各组S180移植瘤组织细胞周期、凋亡率及PCNA蛋白表达水平。3、免 疫组化方法检测VEGF蛋白表达水平，以微血管密度(MVD)作为定量检 中文摘要 mRNA、PCNA 测指标。4、RT-PCR检测VEGF mRNA。5、数据以均数士 (1east significant 0．05为差异无显著性。 率为16．16％；按仅=0．05水准，任意两组间总体均数差异均有统计学意义 5，因此热疗与化疗联合有协同作用。2、流式细胞分析技 别，q=1．171．1 术检测结果：(1)、细胞周期及凋亡率：对照组、热疗组、化疗组、热化 25．58：1：1．89％和1 均上升、S期比例