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3 生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠远期神经行为损伤及相关分子表达的影响 中文摘要 生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠远期神经行为损伤及相 关分子表达的影响 中文摘要 目的探讨生酮饮食对三氟乙醚诱导的新生期反复惊厥大鼠远期神经行为损伤及 相关分子表达的影响。 方法 日龄8 天(用P8 表示，下同) 的Sprague-Dawley(SD)大鼠24 只，按照随机 数字表法分为对照组(NS 组)和惊厥组(RS 组) ，每组各12 只。RS 组大鼠吸入三氟乙 醚诱导惊厥发作，反复诱导惊厥持续30 分钟，每日一次，相同方法连续诱导8 天； NS 组除不吸入三氟乙醚其余操作相同。于P21 依据是否给予生酮饮食(KD)干预，每 组大鼠按照随机数字表法再分为两组，即未惊厥普通饮食组(NS+ND 组) 、未惊厥生 酮饮食组(NS+KD 组) 、惊厥普通饮食组(RS+ND 组) 、惊厥生酮饮食组(RS+KD 组) ， 每组各6 只。NS+ND 组和RS+ND 组给予普通饮食，NS+KD 组和RS+KD 组给予生 酮饮食，饮食干预 10 天。于KD 实施当天、7 天、10 天每组大鼠尾静脉采血监测血 糖及血酮值。自 P9 起隔天测量并记录每组大鼠的体重。于 P27 、P31 分别进行两次 神经行为学测试，包括平面翻正、悬崖回避、前肢悬吊、负向趋地反应实验。P31 行 旷场实验。于P32 大鼠断头取海马及大脑皮质，采用免疫印迹法（western blot ）检测 各组大鼠海马及大脑皮质中CathepsinE、ZIP7 、MT3 、CLU 蛋白的表达。 结果 1、对体重的影响：生酮饮食干预前，RS 组P17~P20 各时间点体重较NS 组对应时间点明显降低（P0.05 ）。生酮饮食干预期间（P21~P31 ），四组大鼠的体重 变化存在总体性差异(P0.05)，进一步组间两两比较，NS+KD 组 P25~P31 各时间点 体重较NS+ND 组对应时间点明显降低(P0.05)，RS+KD 组P23~P31 各时间点体重较 RS+ND 组对应时间点明显降低(P0.05) 。 2 、神经行为学测试：(1)平面翻正实验：与NS+ND 组相比，RS+ND 组（P27 、 P31 ）平面反正时间明显缩短(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组（P27 、P31 ） 平面翻正时间明显延长(P0.05) 。(2)悬崖回避实验：与NS+ND 组相比，RS+ND 组（P27 、 P31 ）悬崖回避时间明显延长(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组（P27 、P31 ） I 中文摘要 生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠远期神经行为损伤及相关分子表达的影响 悬崖回避时间明显缩短(P0.05) 。(3)前肢悬吊实验：与NS+ND 组相比，RS+ND 组（P27 、 P31 ）前肢悬吊时间明显缩短(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组（P27 、P31 ） 前肢悬吊时间明显延长(P0.05) 。(4)负向趋地反应实验：与NS+ND 组相比，RS+ND 组（P27 、P31 ）负向趋地反应时间明显延长(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组 （P27 、P31 ）负向趋地反应时间明显缩短(P0.05) 。 3、旷场实验：与NS+ND 组相比，RS+ND 组延迟时间明显延长(P0.05)、开场 得分明显降低(P0.05)、修饰次数明显增多(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组 延迟时间明显缩短(P0.05)、开场得分明显增加(P0.05)、修饰次数明显减少(P0.05) 。 4 、免疫印迹：(1)与 NS+ND 组相比，RS+ND 组海马及大脑皮质 CathepsinE、 MT3 、CLU 的表达明显增高(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组 CathepsinE、 MT3 、CLU 的表达明显降低(P0.05) 。(2)与NS+ND 组相比，RS+ND 组海马及大脑 皮质ZIP7 的表达明显降低(P0.05)；与RS+ND 组相比，RS+KD 组ZIP7 的表达明显 增高(