脑脊液单核细胞内PPD及ESAT-6抗原检测对结核性脑膜炎诊断价值的探讨.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 断价值的探讨 前言”一““一“”·············”··“··一···””一一····”“一””…一一“一””·99日{J舌”一““一“”一””一”“”“”““”“””一一““”“一””…一一“一””‘ 材料与方法……………………………………………………………10 结果…………············……………···················…………··一····13 附图………··……………·····…····································一“····15 附表………………………………………………………………“…·17 讨{仑………………………………·················……··……·······…·19 结{念…………………····…······…···········…···……····…·……····23 参考文献………………………………………………………………24 综j苤………………………………………………………···…………“·…28 致谢………····…………………………………………··…··············…·37 个人简历……………………………………………………………………38 中文摘要 脑脊液单核细胞内PPD和ESAT-6抗原检测对结核 性脑膜炎诊断价值的探讨 摘 要 目的：结核性脑膜炎(tuberculous 核的7．10％【l】，是由结核杆菌引起的中枢神经系统感染性疾病，致残率和致 死率较高，其预后与早期诊断及时治疗密切相关。但结脑的诊断，尤其是 早期诊断比较困难，因为结脑患者的脑脊液(CSF)中结核杆菌的数量很 少，脑脊液涂片抗酸染色阳性率很低约为10％，而结核菌培养所需时间 关性研究表明结核抗原存在可以作为结核菌存在的证据【31，因而检测脑脊 fluid 液(cerebrospinalCSF)中的结核抗原对TBM的诊断很有价值。免疫 组化法检测脑脊液单核细胞内结核菌素纯蛋白衍生物(proteinpurified 有一些不足之处。PPD为成分不明确的复合抗原(多克隆)，存在一定的 假阴性和假阳性，因此寻找一种独特的抗原对TBM的诊断非常必要。早期 分泌性抗原靶6(6Kdearlysecretory antigenic 枝杆菌感染早期所分泌的蛋白，具有高度的分布特异性和良好的免疫原 性，当结核杆菌在感染的单核巨噬细胞内生长时，ESAT．6抗原表达量明 显提高，因此采用单克隆抗体(免疫组化法)检测脑脊液单核细胞内 ESAT．6可能会增加诊断结脑的敏感性和特异性。本课题研究的目的是将 ESAT．6与PPD对结核性脑膜炎的诊断价值进行比较，为结核性脑膜炎的 诊断提供有效的方法。 两组，一组为结脑组：入选标准参考Ahujat3】的临床诊断标准，共20例， 例，合并颅外结核者4例。另一组为对照组：共20例，男9例，女11 例，年龄1．59岁，中位值年龄26岁。根据第五版神经病学诊断标准入 选，其中化脓性脑膜炎5例，新型隐球菌脑膜炎2例，病毒性脑膜炎8 例，脑囊虫病1例，脑肿瘤2例(听神经瘤l例，肺癌脑转移1例)，脊 中文摘要 髓炎1例，布氏杆菌病1例。对所有患者均进行脑脊液常规、生化、细胞 Shandon 学检查(MGG染色)和阿利新兰染色。取脑脊液lml，用Therm．4 去离子水孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性。滴加封闭用山羊 血清工作液室温孵育15分钟倾去。一张玻片滴加适当比例稀释的单克隆 性对照。4。C冰箱孵育过夜。PBS冲洗3次每次3分钟。滴加生物素化二 3分钟，滴加辣根酶标记的链酶卵白素工作液， 37℃孵育15分钟，PBS 胞胞浆呈棕色为阳