香鱼plecoglossusaltivelisnfκb抑制因子α-biolineinternational.pdfVIP

动 物 学 研 究 2013，Aug. 34(4): 399−405 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI:10.11813/j.issn.0254-5853.2013.4.0399 香鱼（Plecoglossus altivelis ）NFκB 抑制因子 α 基因 PaIκBα 克隆及表达 * 张文青, 龚一富 , 章 丽, 李 军, 刘晓丹 宁波大学 海洋学院，浙江 宁波 315211 摘要：核转录因子 κB 抑制因子 α （IκBα）是NFκB/IκB 信号传导通路的重要成员，参与机体抗细菌感染等多种免疫反应， 可通过蛋白质间的相互作用结合核转录因子 NFκB ，从而调控生物体多种免疫基因表达。该研究采用RACE 技术从香鱼中克 隆得到核转录因子κB 抑制因子 PaIκBα基因的 cDNA 全长序列（1 341 bp, GenBank Accession No.JN801027），开放阅读框 ORF 为 936 bp，编码 311 个氨基酸，5非编码区为 64 bp，3非编码区为 341 bp 。生物信息学分析表明，香鱼IκBα蛋白的序 列中包含 5 个保守的锚蛋白重复序列，N 末端含有信号诱导蛋白，C 末端含有 PEST 序列。同源性比对结果表明，香鱼 IκBα 蛋白与胡瓜鱼 IκBα的同源性最高，为95% ；其次是大西洋鲑、虹鳟、尼罗罗非鱼和鳜鱼等，同源性分别为76%、75%、70% 和 68% 。系统进化树分析表明，香鱼 IκBα 蛋白与胡瓜鱼、虹鳟、尼罗罗非鱼、鳜鱼和大西洋鲑等亲缘关系最近。RT-PCR 分析表明，PaIκBα 基因在香鱼肝脏、肾脏、脾脏和鳃中表达水平较高，其次是肠、脑和肌肉，在心脏中表达极少。嗜水气 单胞菌（Aeromonas hydrophil ）感染香鱼后，PaIκBα基因表达增强，感染 24 h 达最大值，表明 PaIκBα基因在香鱼受到嗜水 气单胞菌刺激的免疫过程中可能发挥着重要作用。 关键词：香鱼；IκBα；克隆；嗜水气单胞菌；基因表达 中图分类号：Q786 ；S917.4 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2013)04-0399-07 Cloning and expression analysis of the NFκB inhibitor IκBα of ayu (Plecoglossus altivelis) * Wen-Qing ZHANG, Yi-Fu GONG , Li ZHANG, Jun LI, Xiao-Dan LIU School of Marine Sciences, Ningbo University, Zhejiang 315211, China Abstract: The NFκB inhibitor (IκBα) is an integral part of NFκB/IκB signaling pathways, which plays roles in a variety of immune responses, such as bacterial infection resistance. By interacting with nuclear transcription factor NFκB, IκBα controls a variety of biological immune gene expressions. In this study, full-length cDNA (1341 bp) of the NFκB inhibitor IκBα (PaIκBα, GenBank Accession No. JN801027) of Plecoglossus altivelis was obtained by RACE and PCR, and included a 5 untranslated regi