诱导人骨髓间充质干细胞向运动神经元分化的探究.pdf

IIII IIIIIil／11111 Y1 摘要 摘 要 bonemarrow stem 目的探讨人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal cells，hMSCs)在体外诱导向运动神经元分化的潜能。 方法取正常人新鲜骨髓，用密度梯度离心法分离hMSCs，在含有10％胎 用传代后的第1代hMSCs分为诱导组和对照组，诱导组的细胞在完全培养基中加 la u 入终浓度为10g／L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预处理24d,时后，用0．5 ng／mL音猬因子(Shh)联合诱导10天。对照组不加上述诱导 g／ml维甲酸(RA)和200 剂。光镜下观察其分化过程中hMSCs的形态变化；免疫细胞化学检测诱导前后 细胞是否表达神经干细胞特异性标志蛋白神经巢蛋l刍(nestin)、神经元细胞特异 性烯醇化酶(NSE)，并计算阳性细胞所占比率：用流式细胞仪检测是否产生运 动神经元标志物HB9及运动神经元在总的细胞数中所占比率，并用流式软件分析 结果。 结果诱导组hMSCs经诱导后能分化为具有典型神经元形态的细胞，部 著性(p0．05)。 结论hMSCs在体外条件下能诱导分化为运动神经元样细胞。 关键词：骨髓间充质干细胞；运动神经元；诱导；分化 ABSTRACT marrow thedifferentiation ofhumanbone ectiveTo potentiality obj explore invitro· stem motorneurons cells(hMSCs)into mesenchymal amethodof bonemarrow fromfresh ThehMSCswereisolated by Methods of inatotalmedium andcultivated densitv amplified centrifugation，then gradient