钾及Kv1.3通道对巨噬细胞功能的影响.pdfVIP

摘要 摘要 持续性不卧床腹膜透析(ContinuousPeritoneal AmbulatoryDialysis，CAPD) renal 是终末期肾脏病(end disease，ESIm)的替代治疗方法之一。然而， stage 腹膜透析相关性腹膜炎是腹膜透析主要并发症，是技术失败的主要原因。研究 显示低钾在腹膜透析患者中发生率在10％一36％不等，老年患者中的发生率可高 达55．6％。近年研究提示低钾是腹膜透析相关性腹膜炎发生的危险因子之一。电 channel 压门控性钾通道1．3(voltage—gatedpotassium1．3,Kvl．3)是钾离子进出细 胞的主要途径之一。Kvl．3在自身免疫性疾病淋巴细胞表达异常，选择性阻滞钟 通道，可以有效减轻或延缓疾病的发生发展。那么，作为腹腔局部防御中的主 要细胞群…腹腔巨噬细胞，其Kvl．3在腹膜透析相关性腹膜炎中表达是否发生变 化?低钾血症是否影响腹腔巨噬细胞表面Kvl．3的表达?低钾是否影响巨噬细 胞功能?目前相关研究报道甚少。本研究拟从体内外水平探讨低钟和腹腔巨噬 细胞Kvl．3表达在腹膜透析相关性腹膜炎发生中的可能作用。 第一部分腹膜透析相关腹膜炎患者血钾及腹腔巨噬细胞Kvl．3表达变化研究 一、 目的 探讨腹膜透析相关性腹膜炎患者血钾及腹腔巨噬细胞Kvl．3的表达变化及 其临床意义 二、 方法 本研究为横断面研究，收集2010年3月至2010年8月的中山大学附属第 一医院腹膜透析中心CAPD相关性腹膜炎患者32例。腹膜炎诊断标准参照2005 年国际腹膜透析协会推荐指南。另收集55例CAPD无腹膜炎患者作为对照，记 录患者人口学及血钾等实验室常规检查数据。流式细胞仪检测透出液中巨噬细 胞表面Kvl．3。 三、 结果 比例分别为37：18和17：15，糖尿病肾病分别占24％和19％。对照组和腹膜炎组 摘要 细胞百分比水平、红细胞、血红蛋白水平显著高于对照组(Po．01或P0．05)， 两组血清白蛋白差异无统计学意义。 低血钾主要发生在低白蛋白血症、低尿素氮等营养不良患者和长透析龄患 者；未发现血钾与腹腔巨噬细胞Kvl．3的表达有相关性。与对照组比较，透出液 w．8．78+2．30， 巨噬细胞Kvl．3表达无统计学差异(平均荧光强度9．54+3．61 P0．05)。 四、 结论 腹透相关性腹膜炎患者血钾水平显著下降，透出液巨噬细胞Kvl．3表达与非 腹膜炎患者比较无显著改变。这一结果提示低钾参与腹透相关性腹膜炎的发生。 然而低钾忠者是否对腹膜炎增加易感性值得进一步随访观察。此外腹膜炎时是 否外周血单个核细胞存在K．v1．3相关的免疫异常值得进二步研究。 第二部分低钾对巨噬细胞功能影响的研究 一、 目的 探讨低钾对巨噬细胞功能的影响 二、 方法 4mM和10mM)对巨噬细胞活力(LDH和AnnexinV-FITC凋亡检测)、吞噬功 能(吞噬中性红及Alexa ELISA)。 三、 结果 1．不同浓度钾培养基对巨噬细胞活力的影响： 1．1不同浓度钾培养基作用细胞不同时间培养上清乳酸脱氢酶(LDH)浓度 变化：4h5．4mM钾浓度(生理钾浓度)组、2mM钾浓度组、4mM钾浓度组、 1 U／L、6．55士O．16U／L、6．33+0．52U／L、 0mM钾浓度组LDH分别为：6．47+0．27 6．54+0．18U／L、；8h U／L、7．34+0．32U／L、7．51+0．27 浓度组、10mM钾浓度组LDH分别为：7．18+0．84 U／L、7．734-0．22 U／L；12h5．4mM钟浓度(生理钾浓度)组、2mM钾浓度