第7章 真核基因表达的调控-中.pptVIP

第七章 真核基因表达调控;第七章 真核基因表达调控;真核生物RNA聚合酶Ⅱ的启动子结构;第三节 真核基因的转录 2.转录模板：一个转录单元，包括转录起始位点到终止处的全部DNA序列。 3.RNA聚合酶II：多个亚基组成。 4.转录所需的蛋白因子：参与转录的起始、延伸和终止。 ;第三节 真核基因的转录 5.增强子 增强子是指能使它连锁的基因转录频率明显增强的DNA序列。 ;;第三节 真核基因的转录 5.增强子 5.1特性 增强效应十分明显 增强效应与其位置和取向无关 大多为重复序列 其增强效应有严密的组织和细胞特异性 没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应 许多增强子还受外部信号的调控;第三节 真核基因的转录 5.增强子 增强子的功能是可以累加的。SV40增强子序列可以被分为两半，每一半序列本身作为增强子功能很弱，但合在一起，即使其中间插入一些别的序列，仍然是一个有效的增强子。因此，要使一个增强子失活必须在多个位点上造成突变。对SV40增强子而言，没有任何单个的突变可以使其活力降低10倍。 ;第三节 真核基因的转录 5.增强子 5.2增强子的作用原理 影响模板附近DNA 的双螺旋结构，以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子与启动子之间“成环”连接，活化基因转录； 将模板固定在细胞核内特定位置，促进RNA聚合酶II在DNA链上的结合和滑动； 增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶II进入染色体结构的“入口”。;增强子作用机理 ; 一个增强子可通过将蛋白质带到启动子附近行使其功能。增强子在长线形DNA的相反末端不起作用，但当DNA在蛋白质桥作用下连接成环状时，却能有效地发挥作用。增强子和启动子在两个分开的DNA环上时不起作用，但两环连接时却发生作用。;第四节 反式作用因子对转录的影响;真核生物中转录因子活性调节的主要方式;真核生物中转录因子活性调节的主要方式;真核生物中转录因子活性调节的主要方式;1.DNA结合结构域基序 a.螺旋-转角-螺旋结构（Helix-turn-helix） 是最早发现于原核生物中的一个关键因子，该结构域长约20个aa，主要是两个α-螺旋区和将其隔开的β转角。其中的一个被称为识别螺旋区，因为它常常带有数个直接与DNA序列相识别的氨基酸。 ;螺旋-转角-螺旋结构;螺旋－转角－螺旋（helixturnhelix，HTH）基序 ;b.锌指结构（Zinc finger） 长约30个aa，其中4个氨基酸（2个Cys（半胱氨酸），2个His（组氨酸））与一个Zinc原子相结合。与Zinc结合后锌指结构较稳定，有Zinc参与时才具有转录调控活性 。;锌指结构;锌指(zinc finger) ;c.同源域蛋白（Homeodomain） 最早来自控制躯体发育的基因，长约60个氨基酸，其中的DNA结合区与 helix-turn-helix motif相似，人们把该DNA序列称为homeobox。主要与DNA大沟相结合。 ;d.亮氨酸拉链（Leucine zippers） 是亲脂性（amphipathic）的α螺旋，包含有许多集中在螺旋一边的疏水氨基酸，两条多肽链以此形成二聚体。每隔6个残基出现一个亮氨酸。由赖氨酸（Lys）和精氨酸（Arg）组成DNA结合区。 ;碱性－亮氨酸拉链(basic leucine zipper, bZIP) ;第四节 反式作用因子对转录的影响;e. 碱性螺旋--环--螺旋 （basic helix-loop-helix） 该调控区长约50个aa残基，同时具有与DNA结合和形成蛋白质二聚体的功能，其主要特点是可形成两个亲脂性α-螺旋，两个螺旋之间由环状结构相连，其DNA结合功能是由一个较短的富碱性氨基酸区所决定的。 ;第四节 反式作用因子对转录的影响;2. DNA结合蛋白主要转录激活结构域 b. 谷氨酰胺丰富区(glutamine-rich domain) SP1是启动子GC盒的结合蛋白，其N末端含有2个主要的转录激活区，氨基酸组成中有25%的谷氨酰胺，很少有带电荷的氨基酸残基。酵母的HAP1、HAP2和GAL2及哺乳动物的OCT-1、OCT-2、Jun、AP2和SRF也含有这种结构域。 ;2. DNA结合蛋白主要转录激活结构域 C.脯氨酸丰富区(proline-rich domain) CTF家族（包括CTF-1、CTF-2、CTF-3）的C末端与其转录激活功能有关，含有20%-30%的脯氨酸残基，很难形成α-螺旋。