醛类、酸类化合物的毛细管电泳分离分析研究.pdf

摘要 高效毛细管电泳是离子或荷电离子以电场为驱动力，在毛细管中按其淌度和分配系 数不同进行高效、快速分离的一种电泳新技术。它具备高效、快速、样品用量少，仪器的 自动化程度高、操作简单、试剂消耗少、环境污染小等优点。正因为HPCE具备如此诱人 的优点，使其在生命科学、生物技术、医学药物、环境科学、法医科学等领域都显示了极 其重要的应用前景，在十几年的时间中，毛细管电泳技术发展迅速，特别是在最近几年， 受到分离分析科学家的极大关注，成为生物化学和分析化学中最受瞩目，发展最快的一种 分离分析新技术。 有毒化学品优先控制名单上部分醛类位居前列，是公认的变态反应源，所以醛类的研 究受到人们越来越多的关注。芳香族羧酸化合物在食品、药物等生产中有着很广泛的应用。 其中苯甲酸钠常作为调味料中的食品防腐剂，但是用量过多会对人体有较大的毒害作用， 因此测定食品中芳香族羧酸类化合物含量具有重要的意义。脂肪酸在自然界中分布广泛， 是生物体内重要的营养代谢物质，对于调节某些代谢作用和生理功能起着重要作用。胆汁 酸广泛存在于各种动物胆汁中，能够乳化水中的疏水分子利于消化吸收，平衡胆固醇，消 化脂肪，防止胆结石的形成因此对两者含量的测定对进一步深入研究生理学和病理学以及 临床诊断具有重要的意义。 在醛类和酸类的研究领域，由于这些生物分子没有或者仅有微弱的紫外吸收，直接紫 外检测满足不了低含量组分测定的要求，因此化学衍生化法应运而生，进行了脂肪醛、芳 香酸、脂肪酸、胆汁酸的毛细管电泳分离，结果令人满意。 论文分三章： 第一章 简单介绍了毛细管电泳的发展及其在药物分析、生物分子分离、基因工程研究、临床 医学等各方面的应用，并对毛细管电泳分离被分析物的模式及其相关的基础知识进行了阐 述。 第二章 以9，10．菲醌作柱前衍生试剂，采用非水毛细管电泳模式考察并优化了脂肪醛的分离条 件。不加其他添加剂可实现七种脂肪醛高效基线分离，并在最优化条件下对实际样品进行 了测定，结果令人满意。 第三章 7一氨基．1，3．萘二磺酸(ANDSA)作为柱前衍生试剂用于酸类物质的毛细管电泳分离研究， 分为四部分。 mmol几 3．1以7．氨基一1，3一萘二磺酸作柱前衍生试剂，采用区带毛细管电泳模式，在15 cmx50 9。5，30mmol／L硼酸盐缓冲体系下，采用58．5 B．CD，pH pmi．d．毛细管(有效柱长 50 mbar，8 cm)，20℃，50 s进样，可实现10种苯甲酸及其一元取代物的快速高效基线 分离。并在最优化条件下对生抽、老抽样品中苯甲酸进行定量检测，结果令人满意。 3．2以7．氨基1。3．萘二磺酸作柱前衍生试剂，采用区带毛细管电泳模式考察并优化了 mmol／L硼酸盐缓冲体 CI,-C10十种短链脂肪酸衍生化产物的分离条件。在pH为9．5的30 系下，20℃，50mbar压力进样，进样8s。17分钟内可实现快速高效基线分离，检测限 0．027．0．042眦nol／L，线性范围0．07．5timol／L，并在最优化条件下对葫芦藓、卷柏实际样品 、● 进行了定性定量检测，结果令人满意。 3．3建立了一种用于测定苔藓类植物中长链脂肪酸的毛细管区带电泳．紫外检测方法 酸在18min内可实现快速高效的基线分离和测定。在最优化条件下对葫芦藓实际样品进行 的定性定量检测实验，结果令人满意。 3．4以7．氨基．1，3一萘二磺酸作柱前衍生试剂，采用区带毛细管电泳光二极管阵列检测 器分离测定6种胆汁酸。实验综合考察了缓冲液浓度、pH、温度及添加剂对胆汁酸衍生化 7