羟基磷灰石复合涂层对体外培养成骨细胞影响实验研究.pdfVIP

垡查乾型塑型：堂丝邕童 中文摘 要 层。研究两种涂层材料与体外培养成骨细胞的相互作用，探讨材料对成骨细胞的影响， 以评价生物复合涂层作为种植体的可行性。 材料与方法：用新生24小时内的sD大鼠，无菌操作取其颅盖骨，采用二次酶消化法培 养成骨细胞。倒置显微镜下观察成骨细胞的生长情况并拍照；将第三代成骨细胞接种于 盖玻片上，培养2天后，用常规HE染色法对成骨细胞进行组织学观察并做碱性磷酸酶 磷酸酶法和考马斯亮蓝法测定细胞与材料复合培养2、4、6、8天材料上细胞内的碱性 磷酸酶活性和蛋白质的含量；扫描电镜观察复合培养1、7天时成骨细胞在两种材料表 面的粘附情况。 结果：1、倒置显微镜下成骨细胞214小时后贴壁，细胞形态为三角形或多边形，3天 后，细胞数量增加，体积增大，6天后细胞基本融合成片。 2、光镜下，经HE染色的成骨细胞为三角形、多边形，有多个树状突起，胞核圆形， 呈蓝色，胞浆网状，呈淡红色。 3、通过重氮盐法(改良Kaplow氏法)进行碱性磷酸酶染色，可见成骨细胞的胞核呈紫 色，胞浆中偶见红色颗粒。 4、通过测定成骨细胞与两种材料复合后材料上细胞内碱性磷酸酶活性，2天时8Ti2G 均不明显。 5、扫描电镜观察：1天时，两组涂层材料上均有极少量成骨细胞粘附，7天时，两组涂 层材料上细胞数量均增多，伸展状态良好，8H2B表面细胞数量明显多于8Ti2G。 结论：采用二次酶次酶消化法培养成骨细胞数量多，效果好，可为下一步实验奠定基 垡盔笼查堂鲤逖艺窑 物相容性，以8，ri2G为底层，8H2B为工作层，形成生物复合涂层作为种植体，具有可 行性。 关键词：细胞培养；成骨细胞；复合涂层：碱性磷酸酶：种植体 丝查堂E丛堂盈兰：i丝筮喜 studiesontheeffectof Experiment hydroxylapatitecompoundcoating onosteoblastinvitro Abstract 80％titaniumand Oilthetitaniumas8Ti2G Objective：Todesign 20％underglazeglass alloy and the as coating,spray80％hydroxyalapatite uponsurfaceof8Ti2G 20％bioactive#ass 8H2B twokindsofmaterialactwithosteoblastin the compoundcoating．Tostudy vitro，discuss influenceofmaterialontheostcoblastfromand itsactual as appraise feasibilityactingimplant． Materialsandmethod：OsteoblastWas ratsin24 with obtainedfromcraniaofnewbown houm methodandculturedwith methodofII attachment aseptic digestive tyzyme．The and母uwlll ofo