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胃癌中15-羟基前列腺素脱氢酶与环氧合酶-2关系的研究 摘 要 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发生发展是多因素、多环节、 多基因作用的结果。许多研究显示花生四烯酸代谢的关键酶— 环氧 合酶-2（COX-2）在胃癌的发生发展中起重要作用,而前列腺素生物降 解的关键酶—15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）与COX-2可能存在 相互影响、相互制约的关系，两者之间的相互关系可能在胃肠道肿瘤 的发生发展中起着至关重要的作用。本研究从以下两个方面来探讨 15-PGDH与COX-2在胃癌发生发展中的相互关系： 第一章 COX-2 抑制剂对胃癌细胞生长及 15-PGDH 表达的影响 目的：研究COX-2抑制剂对胃癌细胞生长、凋亡的调节作用以及 对 15-PGDH 表达的影响，探讨胃癌细胞中 15-PGDH 和 COX-2 的可能 关系。 方法：应用选择性及非选择性 COX-2 抑制剂干预人胃癌细胞株 SGC-7901，采用 MTT 法和流式细胞技术观察两类药物对胃癌细胞增 殖、凋亡的影响；RT-PCR 法检测药物干预前后胃癌细胞凋亡相关基 因 survivin、bcl-x1、bax 基因表达的情况；RT-PCR 及 Western blotting 法检测药物对胃癌细胞中 15-PGDH、COX-2 mRNA 及蛋白表 达的影响。 ii 结果：吲哚美辛和塞来昔布均能抑制 SGC-7901 细胞的生长、促 进其凋亡，其抑制作用呈时间/浓度依赖。RT-PCR 检测显示,药物干 预后,随着药物浓度和作用时间的递增, SGC-7901 细胞中COX-2表达 逐渐减低,bcl-x1 和 survivin mRNA 表达较对照组亦显著降低，而 15-PGDH和bax mRNA 的表达则较对照组逐渐升高。Western boltting 法检测显示吲哚美辛和塞来昔布干预后 15-PGDH 的表达较对照组显 著增加。 结论： COX-2选择性抑制剂塞来昔布和非选择性抑制吲哚美辛均 可诱导胃癌细胞中15-PGDH表达，下调COX-2表达，提示胃癌中15-PGDH 低表达与COX-2过表达相关,两者存在一定的制约关系。吲哚美辛和塞 来昔布在诱导胃癌细胞中15-PGDH表达的同时下调抗凋亡基因 survivin、bcl-xl的表达，上调促凋亡基因bax的表达，提示C0X-2 抑制剂有可能通过促进15-PGDH表达，上调促凋亡基因的表达，下调 抗凋亡基因的表达来促进凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长。 第二章 15-PGDH 抑制剂对胃癌细胞生长及 COX-2 表达的影响 目的：应用15-PGDH抑制剂Cay10397干预人胃癌细胞株MKN-28， 观察其对胃癌细胞生长、凋亡的调节作用以及对COX-2和15-PGDH 表 达的影响，探讨胃癌细胞中15-PGDH 和COX-2 的可能关系。 方法：采用MTT 法和流式细胞技术观察药物对胃癌细胞增殖、凋 亡的影响；RT-PCR 法检测药物干预前后凋亡相关基因 survivin、 bcl-x1、bax 基因表达的情况；采用 RT-PCR 及Western blotting 检 测药物对胃癌细胞中15-PGDH、COX-2 基因表达的影响。 iii 结果: 15-PGDH 抑制剂Cay10397 能促进MKN-28 细胞增殖，其增 殖作用呈浓度/时间依赖，在一定浓度范围内，随着药物浓度增加， 作用时间延长，增殖作用越明显；RT-PCR 及western blotting 检测 显示，Cay10397干预后MKN-28细胞中15-PGDH表达下降，同时bcl-x1 和 survivin mRNA 表达增加，而 bax mRNA 表达则降低；COX-2 表达 无明显变化；流式细胞分析显示Cay10397 干预对MKN-28 细胞凋亡无 明显影响。 结论：抑制15-PGDH表达可促进胃癌细胞的增殖，但对COX-2表达 无明显影响，提示胃癌细胞中15-PGDH与COX-2可能存在复杂的调节关 系，共同影响胃癌的增殖和凋亡；15-PGDH 可能通过下调抗凋亡基因 survivin和bcl-x1的表达，上调促凋亡基因bax的表达，从而诱导胃 癌细胞凋亡。 关