VEGF和AngⅡ和DRP相关性和卡托普利对BDR患者血浆VEGF和AngⅡ影响.pdfVIP

直鏊直匡堂堕塑主婴壅生堂焦鲨銮!!鲤!至2 人选标准：选用近期未使用血管紧张素转换酶抑制剂(anglotermin 脏和心脑血管疾病病史；无视网膜光凝术史；无其他严重的眼科疾患的患者作为试验组。 经眼部及全身检查正常者为健康对照组。 1．2方法 1)①一⑥组患者进行眼科检查(包括视力、非接触眼压测量、裂隙灯生物显微镜下眼 前节和玻璃体检查、直接检眼镜或眼底荧光造影检查眼底)。 2)①一⑥组患者的血浆采集：清晨抽取空腹静脉血5ml，分别加入①含3．18％枸橼 酸钠0．3ml的管中3ml和②含EDTA—Na220fll、8一羟基喹啉20m和2一巯基丙醇10皿 存备检，①管用于检测、，EGF，②管用于检测AngⅡ。 3)抽取空腹静脉血后第二天，③。组患者开始口服卡托普利，12．5mg／次，2—3次／ 天，③。组病人不服，两组患者均进行其它常规降糖、对症等治疗。12周后，③。组和③e 组患者复查，再次行眼科检查，抽取空腹静脉血测定。 ml无菌注射器从 4)房水采集：⑤组、⑥组患者，在白内障手术时，做眼球切口前用1 角巩膜缘直接进针入前房抽取房水约0．1—0．2ml，移人已消毒的击∞dorf管中，置于一80℃ 保存备检，用于测定Ⅵ粥F。 1．3主要实验试剂 人ⅥjGFl65ELISA试剂盒，购自武汉博士德生物工程有限公司； 碘[缁I]血管紧张素Ⅱ放射免疫分析药盒，购自北京科美东雅生物技术有限公司； 卡托普利片，上海华源安徽仁济制药有限公司生产。 1．4主要实验仪器 裂隙灯生物显微镜，YZ5EII型苏州六六视觉科技股份有限公司生产； 非接触眼压计，CT一80型日本TOPCON公司生产； 直接检眼镜，YZ6E型苏州六六视觉科技股份有限公司生产； 眼底造影机，TRC-50EX型日本TOPCON公司生产； 高速可调台式离心机，北京医用离心机厂生产； 低温冰箱，中国海尔公司生产； 全自动酶标仪，WALLAC一1420型Perkinelmer牌日本生产； 智能放免7测量仪、SN系列放射免疫7计数器及测量系统，SN一695B型上海原子 核研究所日环仪器一厂生产。 一 直鐾直堕兰睦堡±堑塞生堂焦迨塞i；!盟堡2 1．5观察指标 ①血浆VEGF和AriaII浓度 ②房水VEGF浓度 ③眼底观察：依据眼底荧光造影检查(FFA)结果判定 有效：点状荧光数量减少，荧光渗漏强度减轻或范围缩小； 无效：点状荧光数量、荧光渗漏强度或范围无变化。 1．6测定方法 ira- murlosorb∞t assay，ELISA)o 步骤： 1)将标本从冰箱中取出，置室温下待测。 钟以上，然后反复搓动以助溶解。 lIll样品稀释液 3)配制2000pg／roa标准品：取0．2mlloooopg／ma的标准品加人有0．8 的effendorf管中，混匀，做上标记。 4)配制1000pg／ml--31．2 pg／ma，250pg／Inl，125pg／nll，62．5pg／IIll，31．2pg／IIll。 释液，分别标记上1000pdrIll，500 取0．3ml ml，加入 2000pg／rnl的标准品加入标记X000泓的管中，混匀后同样取出0．3 下一只管中。余此类推，直到最后一只样品管。 pg／IIIl，250pg／IIlI，125pg／IIll，62．5dIlll，31．2pg／IIll 5)将2000pdma，1000pg／ml，500 的标准品各0．1ml依次加入一排7孔中，第8孔只加样品稀释液的作为0孔，余每孔加 0．1ml已用样品稀释液1