川芎嗪对实验性脑血栓栓塞大鼠血浆磷脂酸影响.docVIP

川芎嗪对实验性脑血栓栓塞大鼠血浆磷脂酸影响摘要：目的：观察川芎嗪(TMP)对大鼠脑血栓形成后血浆磷脂酸(PA)的影响。方法：采用颈内动脉直接插管注入凝血酶建立脑血栓形成大鼠模型，并预防性给予TMP，观察大鼠脑血栓形成后PA的水平。结果：实验验对照组血浆PA水平(10.51±0.73)μmol/L与正常对照组的(3.77±0.28)μmol/L相比有统计学意义(P＜0.05)，预防性给予TMP提前干预的川芎嗪组可以明显降低血浆PA水平，为(4.28±1.02)μmol/L与实验对照组比较有统计学意义(P＜0.05)，而生理盐水组与实验对照组相比无统计学意义。结论：大鼠急性脑血栓形成后血浆PA水平升高，预防性给予TMP可以抑制血浆PA水平的升高。 关键词：川芎嗪；大鼠；脑血栓形成；磷脂酸 中图分类号：R743.P 285.5　文献标识码：A　文章编号：1672－1349(2007)09－0846－02 脑血管病是神经系统的常见病与多发病，其致残率和致死率均较高，是目前人类疾病的三大致死病因之一，而脑卒中事件中80％为脑梗死。近年来的研究表明磷脂代谢的中间产物血浆磷脂酸(PA)和溶血磷脂酸(LPA)是重要的第二信使，在(心)脑疾病的发生过程中可能起重要作用。脑卒中时血浆中PA水平的增高与氧自由基的过度形成有关，PA水平的高低反映脑缺血缺氧的程度。目前针对PA的药物干预的实验报道尚比较缺乏，研究表明川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)具有活血、化瘀、理气功能，以及抗血小板聚集、扩张小血管和改善微循环的作用，临床上广泛用于治疗缺血性脑血管疾病，取得较好疗效。基于以上作用考虑川芎嗪是否有可能降低血浆PA的水平。本实验通过建立大鼠腑血栓形成模型，并预防性给予川芎嗪，观察大鼠脑血栓形成后PA的变化以及对PA的影响。 1　材料与方法 1．1　材　料 1．1．1　实验动物：健康Wistal大鼠30只，体重280 g－300 g，雌雄不限．由山西医科大学实验动物中心提供。 1．1．2　药品、试剂及仪器：盐酸川芎嗪注射液(2 mL含盐酸川芎嗪40 mg，齐齐哈尔第二制药厂)；血栓诱导剂凝血酶(500U，长春海王药业)，LPA测定套试剂(北京泰福仕科技开发有限公司)；其余普通试剂及仪器由山西医科大学研究生实验室提供。 1．2　方　法 1．2．1　大鼠脑血栓模型的建立，本实验动物模型，参照张兆岩等的方法并加以简化改进。术前禁饮食12 h，大鼠用1％戊巴比妥钠(30 mg/kg－40 mg/kg)腹腔注射麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈正中部纵向切开皮肤，切口约2.5cm，分离颈部肌肉，游离出右侧颈总动脉(CCA)，从CCA分叉处向上分离颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。结扎ECA，然后向颅底方向分离ICA，在颅底处小心分离出翼腭动脉，并结扎其根部，仅保留ICA入颅底主干，结扎CCA，暂用2只微型动脉夹间隔一定距离夹闭ICA，在近心端CCA处用眼科剪剪一小口，插入导管(内已抽好血栓诱导剂凝血酶20 U加入生理盐水0.01 mL)固定后，移去近导管端血管夹，少量血液流入导管头端，放置约10min形成一小栓子，然后移去另一只血管夹，缓慢将此栓子和凝血酶注入ICA后，拔出导管，并将CCA切口处结扎，缝合切口；术后单笼饲养(假手术组手术操作过程同上，只是不注入血栓栓子和凝血酶，而仅注入等量生理盐水)。 1．2．2　实验分组：实验动物共30只，随机分为5组，每组6只。正常对照组；假手术组予以假手术，术后3 h，采血检测PA；实验对照组，参照上述方法建立模型，术后3 h采血检测PA，川芎嗪组，0.2 ml/kg养血清脑颗粒以生理盐水溶解，术前每日1次灌胃，连续7 d后建立模型，过程以后同实验对照组；生理盐水组实验前每日等量生理盐水腹腔注射7 d，其余过程同实验对照组。 1．2．3　血浆PA的测定：使用专用试剂及特殊过滤器，按照操作规程，经腹主动脉取全血约4 mL，置于加有专用抗凝剂的抗凝管中，4 000 r/mm离心10 min，准确吸取上清1 mL，抽提磷脂成分、浓缩、分离、过滤。最后加入显色剂于90℃水浴5 min，取出于室温放置35 min后经754紫外分光光度计测定吸光度(OD)值，单位用μmol/L表示。计算公式如下： PA值=(OD观测值-OD对照值)×标准浓度30/(OD标准值-OD)对照值) 1．3　统计学处理：采用SPSS 10.0统计学软件进行统计处理，计量资料以均数±标准差(x±s)表示。组间比较用方差分析，两两比较用LSD法，P0.05表示有统计学意义。 2　结　果 假手术组PA水平为(3.31±0.44)μmmol/L，实验对照