第一章 植物细胞的鹊墨能性.ppt

基础植物生物技术 Basic Plant Molecular Biotechnology;;第一节 植物细胞脱分化与感受态细胞的发生;细胞全能性：广义 是指一个细胞发育成一个完整有机体个体的潜能或特性。 植物细胞的全能性：是指具有完整细胞核的植物细胞，在适宜条件下能够分化发育成完整植株的潜在能力。具有完整细胞核的植物细胞具有形成完整植株所必需的全部遗传信息，在生长发育过程中不同的器官、组织细胞的基因表达有很大的差异，这种差异是遗传信息表达调控机制发生了变化的结果，而不是遗传信息发生了不可逆的消失或钝化。 细胞全能性的表达：从离体培养的植物细胞或组织诱导生长分化成完整植株的过程成为植物细胞全能性的表达;细胞全能性的类型： 在整体植株中，卵细胞的全能性表达最强，受精卵经过 细胞分裂、分化直接形成种胚，并萌发生长成植株； 茎尖、根尖分生组织细胞和形成细胞的全能性次之，它们分别能形成茎叶、根和其他组织与器官； 少数植物的分化成熟的某些器官，例如落地生根叶片，叶肉细胞的全能性直接表达，分化成新的植物； 对于绝大数植物来说，非分生组织细胞难以在整体植株上表达细胞的全能性，必须将他们与整体植株分裂后，在适宜的培养条件下诱导细胞脱分化和再分化，才能使细胞的全能性得到表达，并形成完整的植株。; 植物细胞的全能性;离体培养细胞的全能性表达经历3个阶段，即细胞 脱分化与感受态细胞，细胞分化的诱导或细胞的决定作用以及组织、器官的形态分化和发育 ; 细胞周期与脱分化 成熟细胞脱分化成为分生组织细 胞，需要进入细胞周期。如图2-1 所示,植物分裂细胞从G1期到G2期 脱离细胞周期进入分化，同样分化 细胞脱分化也从G1期到G2期进入细 胞周期。分化细胞能否脱分化进入 细胞周期，取决于其分化成度和原 初的生理状态 。 ;Gautheret 观察到筛管、细胞核开始讲解的木质部细胞，以及细胞壁厚度超过2um的纤维细胞都不能进入细胞分裂。一般来说，细胞的脱分化能力由强到弱依次是营养生长点细胞、形成层细胞、伴胞和分泌细胞、薄壁细胞等（图2-2）。脱分化的营养生长点细胞和形??层细胞能再分化成完整植株，而伴胞、分泌细胞、薄壁细胞、厚壁细胞、纤维细胞和筛管只能成为形成层组织，进行组织分化。 ;二、植物细胞脱分化与感受态细胞发生;三、感受态细胞的发生时期及其细胞特征;有的植物获得感受态细胞的时间较长，可能在细胞若分化时获得形态发生的感受态细胞。例如苹果砧木Jork9试管苗不定根又到中脱分化期和不定根发生的感受态期为0-24h, 诱导期为24-72 h或96 h, 48h 后出现第一次细胞分裂，96h后形成平均30个细胞的类分生组织。有的植物细胞分化后可能才成为感受态细胞，如非洲紫罗兰杂交种叶圆片在茎诱导培养基上培养3-5d后，下表皮细胞开始平周分裂使外植体获得不定芽的感受态。 ;三、感受态细胞的发生时期及其细胞特征;McCade等（1997）利用能够识别AGP上糖类抗原族的单克隆抗体 JIM8，进行了细胞免疫荧光标记，揭示了胡萝卜胚性感受态细胞 发生和生长发育的过程。如图2-3所示，B状态细胞壁完全被JIM8 标记，随着B状态细胞的生长，细胞壁出现极性，一部分细胞壁 不含AGP，不能被JIM8标记，而另外一部分细胞壁则相反。B状态 细胞分裂产生的子细胞分别为C状态细胞和F状态细胞。c状态细胞 不被JIM8标记，且能对胚胎发生的诱导信号起反应，将成为胚胎 决定细胞，并发育成体细胞胚。F状态细胞是液泡化细胞，DNA合 成停止，转变成程序性死亡的G状态细胞。G状态细胞逐渐萎缩、 死亡。因此C状态细胞是感受态细胞，是B状态细胞分裂产生的 结果。;三、感受态细胞的发生时期及其细胞特征;四、分子水平分析脱分化的特征;本次课应掌握的知识点： ;;决定作用：胚胎某一个区域的组织或细胞只能向某一个特定的方向分化的发育状态。对于一个生物体的某一个特定部分，往往一旦经过某个临界时期，随后的发育方向即被决定。所以细胞的决定作用又指细胞特定发育程序的决定。 例如，Steeves和Susex(1953)发现一定培养基上培养蕨类植物紫槭800 uM以上叶原基，只能使其发育成叶；取槭300 uM大小的叶原基培养时则可以生长发育成植株。说明800 uM以上叶原基是紫槭叶发育的临界时期，该叶原基细胞沿叶发育方向生长。 组织培养过程中植物细胞的决定表现在两个方面，即外植体细胞的决定和培养细胞的诱导决定。;第二节 植物细胞的决定作用;一、诱导细胞决定的信号分子;二、决定细胞的细胞特征;诱导后第5d到15d变换培养基改变不了诱导细胞向体细胞胚发育的方向，说明体细胞胚发生的决定已经完成。第15d发生了第一次细胞分裂，第20d在叶外体中出现原胚细胞团。原胚细胞团所有的细胞