HPLC法同时测定复方氨茶碱口服液中氨茶碱及盐酸麻黄碱含量.docVIP

HPLC法同时测定复方氨茶碱口服液中氨茶碱及盐酸麻黄碱含量 　【摘要】 目的：建立高效液相色谱同时测定复方氨茶碱口服液中氨茶碱和盐酸麻黄碱含量的方法。方法：色谱柱C18柱，流动相为乙腈磷酸二氢钾缓冲液（pH 4.5）（10∶90，V/V），检测波长214 nm，流速0.8 mL/min，检测氨茶碱浓度和盐酸麻黄碱浓度。结果：氨茶碱浓度在20.0～500.0 μg/mL，盐酸麻黄碱浓度在2.0～50.0 μg/mL范围内线性良好，氨茶碱和盐酸麻黄碱的平均回收率分别为99.7%（RSD=0.58%）、100.1%（RSD=1.31%），n=9。结论：该法简单、灵敏、准确，可用于该复方制剂的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法；氨茶碱；盐酸麻黄碱 复方氨茶碱口服液是以氨茶碱和盐酸麻黄碱为主要成分的复方制剂，用于治疗小儿喘息性支气管炎。2005版药典用紫外分光光度法测定氨茶碱含量［1］，用非水滴定法和紫外分光光度法测定盐酸麻黄碱含量［2］。已有文献报道氨茶碱和盐酸麻黄碱的高效液相色谱含量测定方法［35］，但同时测定两者含量的方法还未见报道。本文采用高效液相色谱法同时测定氨茶碱和盐酸麻黄碱的含量，该法简单、灵敏、准确。 　　1 仪器与试剂 Agilent 1100系列高效液相色谱仪，包括手动进样器、单元泵、二极管阵列检测器。Jasco V500 UV/Vis分光光度计，MTTLER TOLEDO AL104电子天平，MTTLER TOLEDO 320 pH计。 氨茶碱和盐酸麻黄碱对照品（浙江省药品检验所），复方氨茶碱口服液（批准文号：浙药浙江大学附属儿童医院制剂室自制，批号20060807。乙腈为色谱纯（TEDIA公司），磷酸二氢钾为分析纯（上海试剂二厂）。水为超纯水，电阻率≥18.2 MΩ·cm。 　　2 方法 　　2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax SBC18 (250 mm × 4.6 mm， 5 μm)；流动相：乙腈磷酸二氢钾缓冲液(pH 4.5)（10∶90,V/V）；检测波长：214 nm；流速：0.8 mL/min；进样量：20 μL；柱温：室温。 　　2.2 对照品溶液的配制 精密称取氨茶碱对照品100 mg和盐酸麻黄碱对照品10 mg，分别置于100 mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀即得浓度为1 mg/mL和0.10 mg/mL的储备液，备用。 　　2.3 样品溶液的配制 精密量取复方氨茶碱口服液10 mL，置于50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。用0.45 μm微孔滤膜过滤。精密量取续滤液1 mL，置于10 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。 　　3 结果 　　3.1 色谱图 氨茶碱和盐酸麻黄碱的检测限分别为10、30 ng/mL（S/N=3）, 定量限分别为30、100 ng/mL（S/N=10），保留时间为9.4 min、11.4 min，氨茶碱和盐酸麻黄碱分离度R=4.8，理论塔板数均大于8 000,符合测定要求，辅料对氨茶碱和盐酸麻黄碱均无干扰，色谱图见图1。 　　　3.2 标准曲线制备 精密移取上述对照品储备液各0.2、0.5、1.0、2.0、 5.0 mL置于10 mL容量瓶中，混合、加水稀释至刻度，摇匀，即得氨茶碱和盐酸麻黄碱浓度分别为20.0、50.0、100.0、200.0、500.0 μg/mL和2.0、5.0、10.0、20.0、50.0 μg/mL的混合溶液，按上述色谱条件进样。以峰面积A对药物浓度C（μg/mL）进行线性回归，求得氨茶碱的标准曲线（n=5）为：A=76.85C104.530，r=0.9999, 氨茶碱在20.0～500.0 μg/mL浓度范围呈现良好的线性关系；盐酸麻黄碱的标准曲线（n=5）为：A=38.71C8.203，r=0.9999，盐酸麻黄碱在2.0～50.0 μg/mL浓度范围呈现良好的线性关系。 　　3.3 精密度试验 精密量取对照品储备液分别配制成含氨茶碱和盐酸麻黄碱浓度为20.0、100.0、500.0 μg/mL和2.0、10.0、50.0 μg/mL对照品溶液，一天内连续进样5次，计算日内精密度，氨茶碱和盐酸麻黄碱的RSD在高、中、低三个浓度分别为0.68%、0.71%、1.06%和0.70%、 1.28%、1.66%，符合精密度要求。 　　3.4 稳定性试验 按“2.3”项配制样品溶液，间隔24 h、48 h、72 h在相同的实验条件下进样，氨茶碱和盐酸麻黄碱的峰面积基本没有变化（氨茶碱RSDlt;0.4%，麻黄碱RSDlt;1.9%）。 　　3.5 回收率试验 按复方氨茶碱口服液处方配制不含主药的空白溶液，精密称取