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p73、PTEN及Ki67在子宫内膜样腺癌组织中表达及意义 　【摘要】 目的 探讨p73、PTEN和Ki67蛋白在子宫内膜癌前病变及内膜样腺癌中的表达及意义。 方法 用免疫组化SP法，在13例子宫内膜正常增生期、20例简单型增生过长、22例复杂型增生过长（包括11例不典型增生）及38例内膜样腺癌组织中检测p73、PTEN和Ki67蛋白的表达情况。结果 随着子宫内膜病变的恶性进展，p73和Ki67蛋白的阳性表达率上调而PTEN下调,且p73和Ki67表达上调呈显著正相关（P＜0.01）,Pearson列联系数为0.5144。p73和Ki67蛋白表达与子宫内膜样腺癌组织分化程度有关（P＜0.01）, Ki67和PTEN蛋白表达与子宫内膜样腺癌的临床分期和肌层浸润有关（P＜0.05）。结论 p73和Ki67协同调控子宫内膜腺上皮细胞的生长、增殖，并促进癌变;PTEN表达下调是子宫内膜样腺癌的早发事件。联合检测p73、Ki67和PTEN 蛋白的表达可作为在子宫内膜癌早期诊断的 参考 指标并指导临床早期 治疗 。 毕业论文 【关键词】 子宫内膜样腺癌 p73 PTEN Ki67 免疫组织化学 0 引言 论文代写 人类肿瘤的形成与多因素有关，随着分子生物学技术和实验技术的普及，基因标志物和基因治疗已成为肿瘤 研究 的热点。p73和PTEN均是新发现的基因，子宫内膜癌发生 发展 过程中p73、PTEN和Ki67相关性研究国内外未见 文献 报导。本研究中采用免疫组化SP法探讨p73、PTEN和Ki67表达与子宫内膜样腺癌发生、发展的关系及相关性，寻找早期和癌变过程中阶段性的标志物，为早期诊治子宫内膜样腺癌提供 理论 依据。 论文代写 1 资料和方法 1.1 病例资料 收集湖北襄樊市第一人民 医院 病理科1993～2001年存档的石蜡包埋子宫内膜标本，其中内膜样腺癌38例（高分化28例，中低分化10例），正常增生期13例，简单型增生过长20例，复杂型增生过长22例（包括11例不典型增生过长）。所有病例均经有经验的临床和病理专家确诊。选择的研究对象在诊刮或手术之前均无激素替代治疗及放化疗病史。 1.2 试剂 p73兔抗人多克隆抗体(SC7957)浓缩液(工作浓度1∶100)，通用型SP试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。Ki67鼠抗人单克隆抗体(MAB0129)，PTEN鼠抗人单克隆抗体(MAB0369)，鼠SP试剂盒购自福州迈新生物技术公司。 毕业论文 1.3 方法 取存档蜡块制成4μm厚的切片，采用免疫组化SP法染色。石蜡切片经脱蜡和水化后，用高压修复p73和Ki67抗原：0.01M枸橼酸钠缓冲液（pH6.0）烧开后，放入切片上阀继续加热，待上气维持90秒后取下 自然 冷却;用微波修复PTEN抗原，之后的操作步骤严格按试剂盒说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照。 1.4 结果判断 以细胞胞核或胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性。高倍镜下每张切片选5个视野,每个视野记数100个细胞,其中阳性细胞数≥25%为阳性表达,＜25%为阴性表达[1]。 1.5 统计学处理 采用χ2检验和四格表确切概率法及计数资料的相关 分析 法。 2 结果 毕业论文 2.1 p73、PTEN和Ki67蛋白表达情况 论文代写 p73蛋白定位于细胞核和细胞浆内（见图1、3）；Ki67蛋白表达定位于细胞核内（见图2、4）；PTEN定位于细胞浆内（见图5、6）。经统计学处理，正常增生期、简单型增生过长、复杂型增生过长子宫内膜p73和Ki67蛋白阳性表达率明显低于子宫内膜样腺癌组织，差异有极显著性(P＜0.01)；而PTEN蛋白阳性表达率明显高于子宫内膜样腺癌组织，差异亦具有显著性（P＜0.05），见表1。 图1 简单型增生过长中p73胞核和胞浆表达，SP×400 图2 简单型增生过长中Ki67胞核表达，SP×400 图3 高分化癌中Ki67胞核表达，SP×200 图4 高分化癌中p73胞核和胞浆表达，SP×400 图5 复杂型增生过长中PTEN胞浆表达，SP×400 图6 高分化癌中PTEN胞浆表达，SP×200表1 p73、PTEN和Ki67蛋白在不同子宫内膜中阳性表达情况 2.2 各蛋白表达与子宫内膜样腺癌临床分期、分化程度及肌层浸润的关系 p73蛋白阳性表达率与临床分期及肌层浸润无明显关系 （P＞0.05），而与分化程度有关（P=0.0402）；PTEN蛋白阳性表达率在临床分期中Ⅰ期与Ⅲ+IV期相比差异有显著性（P=0.0319），与肌层浸润有关（P=0.0129），而与分化程度无明显的相关性（P=0.270