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PCNA、MMP9表达及胶质瘤复发相关性 　 作者：张明杰，刁宏宇，王成林 【关键词】 胶质瘤；复发；PCNA；MMP9 　　0 引言 本 研究 选取了反映肿瘤细胞增殖性及侵袭性的指标，增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)和基质金属蛋白酶9（matrix metalloprotEinases9，MMP9），运用免疫组织化学染色技术检测PCNA、MMP9在人脑胶质瘤中的表达，探讨其与胶质瘤复发的关系。 论文代写 　　1 资料和 方法 　　1.1 资料来源 论文代写 收集 中国 医科大学附属第二 医院 在1998～2004年间手术切除同一患者原发、复发胶质瘤标本。其中男15人，女9人，每位患者均取两次术后石蜡病理组织块，共计48块。另外取2004年1～3月间因重度颅脑损伤而行内减压手术切除的脑组织，制成石蜡标本作为非肿瘤对照组，计10例。 毕业论文 　　1.2 临床资料 　　1.2.1 病理分级 毕业论文 　　原发胶质瘤组Ⅰ级6例、Ⅱ级7例、Ⅲ级6例、Ⅳ级5例；复发胶质瘤组Ⅰ级2例、Ⅱ级3例、Ⅲ级8例、Ⅳ级11例。其中，原发肿瘤有7例行术后化疗，6例行术后放疗。 　　1.2.2 胶质瘤复发时间 论文代写 　　24例原发胶质瘤复发时间最短的为1个月，最长的为34个月。其中，Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤平均复发时间分别为20个月、10.71个月、8个月、4个月。 毕业论文 　　1.3 免疫组织化学染色方法 鼠抗人PCNA单克隆抗体、鼠抗人MMP9单克隆抗体、鼠超敏SP试剂盒（即用型）和 DAB显色试剂盒均购自福建迈新生物技术有限公司；采用链菌素亲生物素过氧化物酶法（SP法）进行免疫组织化学染色。 　　1.4 结果判定 毕业论文 PCNA在正常组织和个别低级别肿瘤中不表达，阳性染色主要位于增殖细胞细胞核，少数位于细胞浆，染色特点为细胞核呈棕黄色着色（图略）；MMP9一般在正常脑组织不显色，在胶质瘤中主要位于侵袭边缘瘤细胞和血管基底膜上及内皮细胞胞浆，呈棕褐色异质染色者为阳性（图略）。随机选取5个视野，然后在高倍视野（×400)下计数染色阳性的细胞核数，取其均值并 计算 出阳性细胞核数占所计数细胞总数的百分率。 论文代写 　　1.5 统计学 分析 方法 采用SPSS10.0统计软件对所获数据进行统计学处理，根据实验资料要求，选用两独立样本t检验，配对资料t检验，配对资料的符号秩和检验以及Spearman等级相关分析。 　　2 结果 论文代写 　　2.1 胶质瘤复发前后的比较 将肿瘤复前后病理级别行配对资料的符号秩和检验，显示随着胶质瘤复发，病理级别有增加趋势（Plt;0.01）。PCNA 、MMP9在肿瘤复发后表达强度整体上均呈现增强趋势，经配对资料的t检验，二者P值均＜0.01，具有统计学意义。表1 PCNA、MMP9在原发组和复发组胶质瘤中的对比（略）注：与原发组的比较采用配对资料t检验：at=2.908，Plt;0.01；bt=3.027，Plt;0.01 　　2.2 PCNA、MMP9在不同恶性程度胶质瘤中的表达 PCNA和MMP9在非肿瘤脑组织中均未见表达，在不同恶性程度肿瘤标本中的表达情况，见表2。统计结果显示在原发和复发胶质瘤中，PCNA 、MMP9的表达强度均随着肿瘤恶性度的增加而增强。表2 PCNA、MMP9在不同恶性程度胶质瘤中的表达（略） 　　2.2.1 原发组中不同恶性度之间的比较（独立样本t检验）：at=5.597，P=0.000：bt=3.464，P=0.002 　　2.2.2 复发组中不同恶性度之间的比较（独立样本t检验）：ct=2.159，P=0.042；dt=2.976，P=0.007 　　2.3 PCNA、MMP9的表达与胶质瘤复发的相关性 PCNA和MMP9的表达强度之间无统计学关联（r=0.254，Pgt;0.05）。肿瘤复发时间与PCNA表达、病理级别之间存在统计学意义（r1=-0.857，Plt;0.01；r2=-0.701，Plt;0.01），而与MMP9表达之间无统计学关联（r=-0.305，Pgt;0.05）。 　　　3 讨论 PCNA的表达及合成与细胞的增殖周期有关，其量的变化与DNA合成一致。 目前 认为PCNA可以代表肿瘤细胞增殖能力，在一定程度上反映肿瘤恶性程度，对于 分析 、判断胶质瘤的预后有重要意义。MMP9是基质蛋白酶中一种较为重要的酶 [1]，在肿瘤细胞对细胞外基质的降解、对周边组织的侵袭过程中发挥着重要的作用，同时