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中药多糖分子量及结构探究进展
中药多糖分子量及结构探究进展
【摘要】 目前中药多糖药理作用研究比较活跃,而其分子量和分子量分布及化学结构确定成为进一步深入研究多糖特异性和构效关系以及药效机理的基础。该文归纳总结了多糖分子量和分子量分布及化学结构研究的方法。
【关键词】 中药多糖; 分子量; 分子量分布; 化学结构; 生物活性
Abstract:The study on pharmacological action of polysaccharide of traditional Chinese drug is more active at present, but the definition of molecular weight and molecular weight distribution and chemical constitution has become the foundation of better study on specificity and structure-function relationship and drug action mechanism of polysaccharide. The methods of study on molecular weight and molecular weight distribution and chemical constitutuion of polysaccharide were reviewed in this paper.
Key words:Polysaccharide of traditional Chinese drug; Molecular weight; Molecular weight distribution; Chemical constitution; Biological activity
多糖通常是由几百甚至几千个单糖组成的高分子均聚物或共聚物,其能被水解为多个单糖。多糖存在于植物和动物之中,在高等植物和藻类中,它们是细胞壁或细胞内部的组分;在细菌和真菌中,它们可能既是细胞组分,又是新陈代谢的产物。多糖分子量很大,其性质也大大不同于单糖和低聚糖。现代研究发现茯苓、黄芪、猪苓、枸杞、柴胡、人参、香菇、云芝、银耳、灵芝、冬虫夏草等中药其生物活性成分之一是多糖,具有免疫调节、抗辐射、抗凝血、降血糖、降血脂等功效,而它们的生理活性与多糖分子量和分子量分布及化学结构有密切关系。
1 中药多糖分子量和分子量分布研究
中药多糖是生物大分子,属高分子化合物,其分子量的测定方法有绝对法、当量法和相对法。表示其分子量大小的方式有重均分子量(Mw),数均分子量(Mn),粘均分子量(Mη)和Z均分子量(Mz)。多糖大多数情况下Mn< Mη< Mw< Mz 。多糖的分子量分布是指多糖中各种不同的分子量组分在总量中所占的各自的分量,一般用分子量分布指数α表示,即重均分子量与数均分子量的比值(α=Mw / Mn) ,α比值愈大,说明分子量分布愈宽,当α=1时,是分子量均一体系。对于生物大分子多糖来说,其分子链的长短可以是不同的,在衡量其分子量时,往往是一个平均数。重均分子量是按分子重量统计平均的分子量,测定方法有光散射法、超速离心沉降速度法以及凝胶渗透色谱法等。数均分子量就是依据总体分子的的个数,求出分子量来的,数均分子量测定方法有端基分析法,气相渗透法,沸点升高冰点降低法,膜渗透压法,凝胶渗透色谱法等。中药多糖主要测数均分子量和重均分子量。目前常用体积排阻色谱法(包括凝胶渗透色谱法和高效凝胶渗透色谱法)测定多糖分子量和分子量分布。2005年版《中国药典》Ⅱ部中收载了用高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量及分子量分布方法。
1.1 凝胶渗透色谱法(GPC)
凝胶渗透色谱法它是根据在凝胶柱上不同分子量的多糖与洗脱体积成一定关系的特性,先用各种已知分子量的多糖制成标准曲线,然后由样品的洗脱体积从曲线中求得分子量。用凝胶过滤法测分子量,每次缓冲液及流速均需一致,否则会产生较大的误差,凝胶柱多采用软质凝胶,常用的商品型号为交联葡聚糖sephadex,琼脂糖Sepharose,聚丙烯酰胺BIo-Gel P。A. E. A. Oliveira1等[1]用GPC法测定了刀豆属植物种子外皮多糖的重均分子量(Mw)为8 830。孔庆胜等[2]采用凝胶过滤法测定南瓜多糖分子量,SephadexG-200层析柱,硫酸-苯酚法检测,测得南瓜多糖的平均分子量为16 000。陈洪亮等[3]用葡聚糖凝胶过滤法测定芦荟多糖分子量,所用凝胶为SephadexG-150,硫酸-苯酚法跟踪检测,结果分子量为45 400。盖英萍等[4]将桑叶多糖粗提取物通过SephadexG-2
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