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五味子多糖最新探究进展 　 作者：闫舒，仰榴青，赵婷，赵江丽，邹艳敏 【关键词】 五味子多糖； 提取分离； 纯化分级；药理作用 　　五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实，习称“北五味子”。性酸、甘、温，归肺、心、肾经，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心之功效。用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗，盗汗，津伤口渴，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠［1］。五味子的主要活性成分为木脂素、多糖和挥发油等。有研究报道，五味子多糖具有调节免疫、抗肿瘤、抗病毒、降血糖等作用［2］。本文综述了近年来五味子多糖在提取分离、纯化分级和药理作用等方面的研究进展，为五味子多糖的研究、开发和利用提供参考。 　　1 提取分离 　　多糖是极性大分子化合物，五味子多糖的提取一般采用水提醇沉法，用苯酚-硫酸或蒽酮-硫酸为显色剂，采用比色法对五味子多糖进行含量测定。水提醇沉法中影响多糖提取的因素主要有料液比、提取温度、提取时间和提取液pH值等。赵婷等［3］以多糖得率为考察指标, 在单因素实验结果的基础上, 进行正交实验设计, 考察料液比、温度、时间对多糖得率的影响。结果表明，温度是影响粗多糖得率的重要因素, 水提法最佳工艺为料液比1∶14，温度100℃，时间6 h，提取2次，此条件下五味子多糖的得率为11.52%，粗多糖样品中多糖含量为44.46%。范荣军等［4］考察pH值、乙醇浓度、次数、温度、料液比、时间等单因素确定碱水法和醇碱法提取五味子多糖的最佳工艺，并与文献报道水提取法做了比较，测定3种溶剂最佳工艺条件下的多糖得率。结果表明，醇碱法对五味子多糖的提取率最高，为水提法得率的1.12倍，碱水法得率的1.06倍。在热水浸提基础上采用微波、超声波进行辅助提取是对传统提取方法的一种改进，可有效提高五味子多糖的提取率［5］。另外，有研究表明不同采收期和加工方法对五味子质量也有明显影响［6］。 　　2 纯化分级 　　采用水提醇沉法得到的多糖粗制品中，一般含有无机盐、蛋白质、低相对分子质量有机物等许多杂质，为进一步研究多糖提供较纯的物质原料，必须要对粗多糖进行纯化。纯化主要包括脱蛋白、脱色和分级沉淀等步骤。脱蛋白常采用的方法有Sevag法、三氯乙酸法、酶法以及酶法与Sevag联用法等。目前最常用的是Sevag法，但有研究证明酶法与三氯乙酸-正丁醇法结合脱蛋白效果最佳［7］。脱色可采用活性炭、H2O2或DEAE-纤维素法，目前最常使用的是活性炭。多糖分级可采用乙醇分级沉淀法、电泳法、超滤法和柱层析法。常用的柱层析法有DEAE-纤维素柱，Sephadex柱、Sepharose柱等。 　　张兰杰等［8］经提取、醇析、Sevag法脱蛋白、脱脂、脱色、DEAE纤维素柱色谱等步骤，从北五味子中分离出两种多糖组分，并经紫外光谱、红外光谱确证纯度。北五味子中粗多糖含量6.1%，三次提取率分别为55.6%，38.5%和4.6%，Sevag法脱蛋白粗多糖损失率为7.2%，北五味子中两种纯多糖含量分别占果实重量的0.387%和0.061%。韩学忠［9］用乙醇为沉淀剂，采用恒温沉淀分级法对五味子多糖进行分离和分级，将精制五味子多糖样品分成5级。测量不同分级多糖的含量，根据各级分的含量可将五味子多糖分成两部分，具有药效而相对分子质量小的可用来制作注射用药。 　　3 药理作用 　　3.1 免疫促进作用 　　免疫是机体抵御外界刺激的一种自身防御作用。多糖作为一种生物反应调节剂，能在多条途径、多个层面对机体免疫系统发挥调节作用。研究表明［10］，五味子多糖主要通过对淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统等的作用调节机体的免疫功能。仰榴青等［11］的研究表明，北五味子脱蛋白粗多糖能极显著地增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(Plt;0.001)，未脱蛋白粗多糖能显著增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(大剂量组Plt;0.01、小剂量组Plt;0.05)，而南五味子粗多糖只有大剂量组能增强腹腔巨噬细胞吞噬功能(Plt;0.05)，并呈一定的量效关系。南、北五味子粗多糖大、小剂量组能显著提高小鼠血清溶血素水平(Plt;0.01)。表明五味子醇提残渣中粗多糖具有较好的免疫增强作用。 　　3.2 抗氧化和抗衰老作用 　　现代自由基医学研究表明，生物体的衰老、癌变、炎症以及免疫性疾病等都与自由基代谢失衡有关。五味子多糖可使荷瘤小鼠血浆超氧化物歧化酶（SOD）水平明显升高，丙二醛（MDA）水平明显下降，说明五味子多糖可以抑制自由基的产生，有一定的抗脂质过氧化作用［12］。苗明三［13］研究发现五味子多糖具有较好的抗衰老作用，可使衰老小鼠已萎缩的胸腺及脾脏明显增大增厚，胸腺皮质细胞数及脾淋巴细胞数明显