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余甘子叶提取成分没食子酸体外抗肿瘤实验探究
余甘子叶提取成分没食子酸体外抗肿瘤实验探究
作者：钟振国， 梁红， 钟益宁， 张雯艳，
潘志海， 卢红梅， 韦小清， 黄金兰， 李鹏
【摘要】 目的探讨从余甘子叶提取分离得到的活性成分没食子酸的抗肿瘤作用。方法采用MTT法和细胞集落形成法观察没食子酸对人肝癌细胞株Bele7404、人胃癌细胞株SGC7901、小鼠肝癌细胞株H22和小鼠肉瘤细胞株S180 4种肿瘤细胞的体外抑制作用。结果MTT法和细胞集落形成法测定的结果均显示，当没食子酸浓度在2.5 μg/ml 以上时，4种肿瘤细胞株的生长均受到明显抑制。结论余甘子叶提取成分没食子酸在体外对不同组织来源的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。
【关键词】 余甘子叶提取物 没食子酸 MTT法 细胞集落形成法 体外抗肿瘤作用
Abstract：ObjectiveTo isolate the anti-tumor activity components for gallic acid from the ethanol extract of the ethyl acetate fractions of the leaves of Phyllanthus emblica L. MethodsThe growth inhibition was analyzed by MTT and cell colony measurement technique in the hepatocellular carcinoma Bele7404, stomach carcinoma SGC7901, hepatoma H22 and fibrosarcoma S180 cells line in vitro.ResultsMTT assay and cell colony measurement technique were indicated, the growth of four tumor cells were obviously inhibited when gallic acid concentration was at 2.5 μ g / ml and above.ConclusionThe results suggest that gallic acid is cytotoxic to the variety of the cancer cells.
Key words：Extract from leaves of Phyllanthus emblica L.； Gallic acid; MTT; Cell colony measurement technique; Anti-cancer effect in vitro
余甘子叶Phyllanthus emblica L.系大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠属Phyllanthus落叶小乔木或灌木的叶。余甘子树在我国主要分布在福建、广东、云南、贵州、四川、海南、广西等省区，资源丰富。《本草纲目》中记载:余甘子性凉, 味甘酸涩, 具有清热凉血、消食健胃、生津止咳之功效, 民间常用来治疗消化不良、腹泻、咳嗽、乙型肝炎、腹水、便秘、肿瘤、发热、皮肤病、高血压、胆囊炎及癌症等疾病［1］。余甘子叶在民间应用也较广泛，但有关余甘子叶的药理研究报道非常少。没食子酸是从余甘子叶提取分离出的两个化合物之一。为了了解没食子酸是否具有抗肿瘤作用，本实验将没食子酸在体外进行了抗癌活性研究。现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 药物野生余甘子叶采自广西中部地区，经广西中医学院刘寿养教授鉴定。从余甘子叶提取分离得到化合物没食子酸。
1.2 肿瘤细胞株人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404均购自上海细胞生物研究所细胞库；小鼠肝癌细胞株H22和小鼠肉瘤细胞株S180均购自广西中医药研究所。
1.3 试剂MTT（四甲基噻唑蓝）为德国Sigma公司产品，批号：020609；FBS（胎牛血清）为美国Hyclone公司产品，批号：0407；RPMI1640培养基为美国GIBCO公司产品，批号：1120708；Trypisn (胰蛋白酶)购自天津市景洋生物制品有限责任公司，批号：200503；DMSO（二甲基亚砜）购自天津汇英化学试剂有限公司，批号Wright,s stain（瑞氏染色素）购自上海三爱思试剂有限公司，批号Giemsa,s stain（吉氏染色素）购自上海试剂三厂，批号卡那霉素，德国Sigma公司分装；L-谷氨酰胺，Amresco分装。
1.4 仪器CO2培养箱（Thermo Forma），美国产，型号：381；倒置显微镜（Olympus），日本产
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