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制何首乌对大鼠肝损伤实验探究 　 作者：耿增岩，陈金铭，于德红 【摘要】 目的研究不同剂量的野生制何首乌对大鼠的肝损伤。方法本实验给药组每天按不同剂量(分别相当于成人每日12 g临床用量的20，50，100，200 倍)灌胃大鼠一次,前3 个月为给药期, 第4个月为停药恢复期, 分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH - ST)检测及进行大鼠肝脏组织病理学检测。结果与对照组相比, 大剂量和较大剂量给药组对大鼠肝脏转氨酶AST在3个月时有一定的影响(Plt;0.05),MDA有显著性升高(Plt;0.05)。肝脏组织病理切片显示光镜下大剂量给药组可见散在炎细胞浸润, 肝血窦充血, 枯否氏细胞增生活跃并可见吞噬色素颗粒。结论制何首乌大剂量长期灌胃对大鼠肝脏有轻度的肝损害,常用剂量各阶段应用则未见毒副作用。停药后可恢复正常。 【关键词】 制何首乌; 毒性实验 中药何首乌别名首乌、赤首乌。为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根[1]。是一味较常用的中药,临床多以制首乌入药，制首乌味甘、涩、微温,具有补益精血、固肾乌须之功效。何首乌自古以来即为常用补药，今人又用于治疗动脉硬化症、高脂血症[2]等疾病。与此同时临床出现的不良反应也逐渐被人们重视起来。本试验旨在探求制何首乌不同剂量长期服用对大鼠肝脏损伤的程度,为临床更好的应用此药提供参考依据。现将对野生何首乌制品所进行长期毒性[3]动物实验研究的结果报告如下。 　　1 材料 　　1.1 动物健康SD大鼠100只,雌雄各半,体质量(100±10)g，由西安交通大学医学院动物实验中心提供,动物合格证号:医动字第08-004号。 　　1.2 药材选用陕西野生何首乌，按照《中国药典》2005版Ⅰ部制何首乌标准进行炮制。然后将制何首乌水煎液浓缩至含生药4 g/ml，定容，密封后放于4℃冰箱储存备用。MDA，MAO，GSH - ST试剂盒购自南京市建成生物工程研究所。 　　2 方法 　　2.1 长期毒性实验健康SD大鼠100只，按性别体质量随机分成5组，即小剂量组、中剂量组、较大剂量组、大剂量组及对照组。每组20只，雌雄分笼饲养。给药组剂量依次为4，6，22，40g/kg(分别相当于成人每日临床用量的20，50，100，200倍)，对照组给予等体积蒸馏水。灌胃给药1次/d。每周称体质量1次，根据体质量调整给药容积[4] 。前3个月给药，第4个月停药恢复。分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛( MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽- S转移酶(GSH -ST)检测，并进行大鼠肝脏组织病理学检测。 　　2.2 统计方法统计方法计量资料以均±s表示，用t检验进行组间比较，以Plt;0.05为差异显著。 　　3 结果 　　3.1 大鼠2个月血液生化学检测指标 结果显示大剂量组、较大剂量组AST、ALT无显著性变化。见表1。表1 给药2个月大鼠血液ALT，AST指标各给药组与对照组比较，Pgt;0.05;n=10 　　3. 2 大鼠3个月血液生化学检测指标　结果显示大剂量组、较大剂量组ALT无显著性变化,大剂量组AST显著升高(Plt;0.05) 。同时肝组织匀浆检测与对照组比, 大剂量组MDA有显著升高(P lt;0.05)。见表2。 　　3. 3 大鼠4个月血液生化学检测指标　结果显示大剂量组AST，ALT无显著性变化。见表3。表2 给药3个月大鼠血液ALT，AST及组织中MDA，MAO，GSH-ST指标各给药组与对照组比较，*Plt;0.05;n=10表3 给药4个月大鼠血液ALT，AST指标各给药组与对照组比较，Pgt;0.05;n=10 　　　3. 4 肝脏组织病理学检测肉眼观察各给药组大鼠肝脏, 其形态正常, 质地柔软, 多呈红褐色, 未见结节、包块、囊肿等; 3 个月末大剂量给药组可见个别大鼠肝脏略微发黄, 其它给药组肝脏无肉眼可见的病理性改变。 　　肝脏病理切片光镜下, 对照组肝细胞轮廓清晰, 呈多边形, 细胞分界清晰, 核圆, 位于细胞中央, 胞浆丰富(见图1)。大剂量组血窦充血及炎细胞浸润较明显, 枯否氏细胞增生并可见吞噬色素颗粒(见图2)。其它给药组以及恢复期大鼠肝脏组织病理性变化不明显。 　　图1 对照组肝脏组 图2 大剂量组肝脏组 　　织病理学观察 织病理学观察 　　4 讨论 　　何首乌为临床常用中药,以往多认为无毒副作用,被广泛用于临床多种慢性病证;有人亦将何首乌当作延年益寿之补品,长期应用。但近年,临床发现某些患者服用何首乌后引起肝损害,导致肝功能异