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多潘立酮片人体生物等效性得发展探究 　　【中图分类号】R914.1 【文献标识码】A【文章编号】1002-3763（2014）02-0007-01 　多潘立酮片是一种针对呕吐症状能产生强力抵抗性的促动药，主要是通过拮抗外周多巴胺D2受体，对胃肠道产生作用，从而增强胃蠕动，排空肠胃，预防出现胆汁反流的情况，保护胃液的分泌不受到影响，同时对消化不良症状以及饮食、感染或是放射性治疗引发的呕吐恶心症状有很好的治疗作用。临床实践证明，多潘立酮能够在人体内迅速吸收，很少出现不良反应，但是利用率却较低。本研究对此展开探讨，以提供更多的临床参考依据。 　资料与方法 　1.1一般资料 　本研究的受试制剂是多潘立酮片，参比制剂是多潘立酮对照品、文拉法辛对照品，以超纯水作为试验用水，色谱纯取甲酸、甲醇、醋酸等，其余的是分析纯。选用API4000LC-MS/MS联用仪作为实验仪器，此外还包括电子天平、高速离心机、超纯水机以及离心浓缩仪。 　1.2方法 　1.2.1质谱色谱形成条件：（1）ESI源作为离子源，其电压保持在5500V，温度为500℃，采用正离子式进行检测，多反应监测进行扫描，多潘立酮[M+H]+，（m/z）426/175.1为质荷比。（2）AgilentZOBAXSBC18（3.0mmtimes;100mm，3.5mu;m），流动相甲醇4mmol/L，含1%0甲酸的醋酸铵为55：45，流速为400mu;l/min，保持30℃的柱温[1]。 　1.2.2受试者条件要求：选取30例健康的男性，年龄在23岁～32岁之间，身高在159cm～186cm之间，体重在50kg～77kg之间，经过检查发现30例受试者在肝功能和肾功能、心电图等方面都显示正常，达到了受试者的要求。经过签署知情同意书，审批以后成为合格受试者。 　1.2.3用药情况和样品采集：30例受试者在进行实验的前两周要禁烟禁酒，不能服用其他的药物。交叉实验的设计要符合单剂量以及二乘二原则，也就是将30例受试者随机分成2组，保证以1周为交叉间隔时间，让受试者在早上8点200mL温水口服20mg参比制剂或是试验制剂，2小时以后饮水，4小时以后进食，在进行服药和取血的时候让受试者在I期临床的病房中进行密切观察。在进行药物的服用之前要对受试者取4ml的空白血样，服药以后进行4ml静脉采血分为为0.1667、0.333、0.5、0.75、1、1.5、2、3、5、8、12、24、30、36小时，采用肝素抗凝试管收集，离心分离血浆并将其存于-75℃的待测血药浓度[2]。 　1.2.4血浆样品的存放条件：加入0.5ml的血浆样品到10ml的具塞玻璃试管当中，加入1.026mu;g/ml内标文拉法辛溶液50mu;l，进行10s旋涡并加入0.5mol/L的氢氧化钠碱液100mu;l混匀，4ml乙酸乙酯并振荡3min，保持10min300r/min离心，将上层有机相3.5ml取下，在40℃的浓缩离心仪挥干，同时加入100mu;l含50%的甲醇溶液进行复溶，1min旋涡，5min2000r/min离心，将上层清液吸取以后做LC-MS/MS分析取5mu;l。 　1.3统计学方法 　本研究采用BAPP3.0软件进行处理，计算相对生物利用度以及药动学参数，测出被试制剂和参比制剂的浓度，通过梯形法计算出转换后的双单侧和方差，t检验，最后对参比制剂以及被试制剂是否生物等效进行评价。 　结果 　2.1方法学考证 　2.1.1特异性分析 　在LC-MS/MS条件下，将多潘立酮保留2.5min的时间，而内标文拉法辛则保留3min时间，保证多潘立酮以及内标峰形良好，不受到杂峰影响，并保持平稳的基线。 　2.1.2标准线性及曲线范围 　以0.321mu;g/L～82.24mu;g/L为标准曲线范围，其中0.321mu;g/L为最低定量限。 　2.1.3准确度和精密度 　0.648mu;g/L表示低，6.48mu;g/L表示中，64.8mu;g/L表示高，这三种浓度的日内相对标准偏差分别是7.04%，2.91%，1.90%，日间相对标准偏差分别是9.25%，7.81%，6.18%，因此，这三种浓度的多潘立酮准确度保持在97.29%～101.75%之间。 　2.1.4回收率提取 　三种浓度的多潘立酮回收率分别为88.24%、79.78%以及67.77%，内标文拉法辛的回收率则是92.19%。 　2.1.5介质效应 　经过LC-MS/MS介质效应分析，三种浓度的多潘立酮介质效应分别是100%、96.63%、99.25%，而内标文拉法辛的介质效应则为98.09%。 　2.1.6样品稳定性分析 　从上述的实验可以得出，低、中、高三种浓度的多潘立酮血浆样品处在室温下放置了2