心肌细胞条件培养液对鼻咽癌细胞生长抑制作用体外实验探究.doc

心肌细胞条件培养液对鼻咽癌细胞生长抑制作用体外实验探究 　 作者：崔艳慧　梁海军　吴敬波　任培蓉　张建文 【摘要】 　　［目的］ 探讨心肌微环境因素对高转移潜能鼻咽癌细胞的影响。［方法］ 原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞，用MTT法比较心肌细胞条件性上清液（CMCM）对高转移潜能鼻咽癌细胞的体外抑制作用。以顺铂作为CMCM的阳性对照，以正常细胞鼠肾小球系膜细胞作为鼻咽癌细胞的阴性对照。［结果］ 鼻咽癌细胞与不同浓度的CMCM共同培养后，细胞存活率明显下降（Plt;0.05），而对正常细胞鼠肾小球系膜细胞存活率无明显影响（P＞0.05）。［结论］ 新生大鼠心肌细胞条件培养液可选择性地抑制鼻咽癌细胞的增殖。 【关键词】 心肌细胞　条件培养液　鼻咽癌细胞　Wistar大鼠 　　An Experimental Research on Inhibitory Effect of Cardiac Muscle Cells Condition Medium on Nasopharyngeal Carcinoma Cells in Vitro Abstract: ［Purpose］ To explore the effect of organic microenvironment of cardiac muscle on the nasopharyngeal carcinoma cell with high metastases potential. ［Methods］ Primary culture of newborn Wistar rat cardiac muscle cells was established, and the murine cardiac muscle conditioned medium(CMCM) was prepared to test its effect in vitro on nasopharyngeal carcinoma cells by MTT assay with cisplatin as positive control for CMCM and benign cells (murine mesangial cells) as negative control for nasopharyngeal carcinoma cells. ［Results］ Proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells was significantly restrained when cultured with CMCM in various concentration（Plt;0.05）,while murine mesangial cells were not affected（P＞0.05）. ［Conclusion］ The conditioned medium of newborn rat cardiac muscle cells can selectively inhibit the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells. Key words: cardiac muscle cell; conditioned medium; nasopharyngeal carcinoma cells; Wistar rat 就会进入血液，由血液及淋巴循环的肿瘤细胞经静脉到心脏，而心脏的转移瘤却很少见。有报道尸检3 327例晚期恶性肿瘤病人，心肌受累者为1.7%[1]，哈尔滨医科大学1978年~1998年恶性肿瘤938例尸检报告，其中心脏转移88例，心肌转移34例，仅占3.6％[2]。且当心脏出现转移瘤时肿瘤大多已发生广泛转移，很少只累及心脏。关于出现该现象的原因，目前国内外尚无满意的研究结论，心肌微环境中是否存在着可溶性因子？基于临床上心肌转移瘤罕见的现象，本实验通过研究体外新生Wistar大鼠心肌细胞条件培养液体外对鼻咽癌细胞增殖的影响，探讨心肌微环境因素对鼻咽癌细胞生长的抑制作用及心肌转移瘤罕见的可能原因。 1 材料与方法 1.1 材 料 Wistar大鼠购自泸州医学院动物中心；CNE-2购自中山医科大学细胞库；正常肾小球系膜细胞MCs由泸州医学院传染免疫室提供；酶联免疫检测仪 (EXL 美国)；0.25％胰蛋白酶（泸州医学院附属医院传染免疫室提供）；0.1%胶原酶（Sigma，北京华美公司提供）；MTT（北京华美公司）；底物溶液DAB试剂盒 (北京中杉金桥生物技术有限公司)；ABC试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）；小鼠抗大鼠横纹肌单克隆肌动蛋白抗体Mouse Anti-Sarcome