正交实验法优选长白山野生越橘中花色苷提取工艺.docVIP

正交实验法优选长白山野生越橘中花色苷提取工艺 　 作者：姜艳霞 吕士杰 田志杰 纪朋艳 罗军 王程 芦小静 雷钧涛 【摘要】 　　目的优选长白山高寒地区野生越橘中花色苷的最佳提取工艺。方法以越橘中花色苷的纯度以及总固体得率为指标,采用正交实验法，优选提取工艺。结果越橘中花色苷的最佳提取工艺：提取次数3次, 提取料液比1∶5(g∶ml) ，提取温度为60℃，提取时间30 min。结论此提取工艺合理可行,适用于提取越橘中的花色苷。 【关键词】 正交实验法 越橘 花色苷 提取工艺 　　Abstract:ObjectiveTo optimize the extraction process of anthocyanin from Vaccinium uliginosum in ChangBaiShan region .MethodsOrthogonal test was used for selecting the optimum of extraction process by the indexes of anthocyanin purity and total solid yield.ResultsExtracting 3 times,30 min each time,five fold volume of water , temperature 60℃,was considered as the optimum extraction condition.ConclusionThe selected technology is reasonable and feasible, and was suitable for anthocyanin extraction. 　　Key words:Orthogonal test; Vaccinium uliginosum; Anthocyanin; Extraction process 　　越橘，是越橘科越橘属的落叶或常绿灌木，属杜鹃花科植物，产于我国吉林、黑龙江、内蒙古等地，其果实可酿酒或制果浆，小浆果蓝色或紫色，是联合国粮农组织推荐的人类5大健康食品之一，富含维生素E和黄酮类色素以及铁、锰等微量元素，果实中的花色苷具有改善视力、延缓衰老、抗疲劳、抗癌和抗炎作用［1］。由于越橘的生长环境，种类的不同，它所含有的花色苷量不同。本研究就长白山高寒地区野生越橘中花色苷的提取进行探讨。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器及试剂721可见分光光度计（上海新茂仪器有限公司）， HH-601型超级恒温水浴锅（北京市医疗设备厂），组织破碎机（佛山市顺德区欧科电器有限公司），SHZ-D循环水式多用真空泵（巩义市英峪华仪器厂），PH050电热干燥箱（上海双五金），T6新世纪紫外可见分光光度仪（普析通用）。乙醇和浓HCl ，均为分析纯，北京化工厂生产。 　　1.2 药材长白山野生笃斯越橘，８月份采收，鲜果冻存。 　　2 方法与结果 　　2.1 越橘中花色苷的制备方法 ［2～6］工艺流程如下：冷冻越桔→破碎→溶剂提取→真空抽滤→花色苷提取液→纯化→花色苷 　　2.2 越橘中花色苷含量测定 　　2.2.1 光谱扫描确定测量最佳波长扫描条件：扫描范围 200～700 nm， 扫描间隔1.0 nm，最佳波长为535 nm。扫描光谱见图1。 　　2.2.2 计算方法按照文献［1,2,5］等的方法计算长白山越橘中花色苷的含量。 　　Acy(mg/100 g)=TODE535/10 1%1 cm=TOD98.2 　　TOD = OD×DV×10D/SV×TEV×1 　　Acy为anthocyanin 的缩写，TAcy 表示总花色苷含量(mg/100 g 越橘鲜果)，TOD表示总吸光度值，ε表示为当某一花色苷质量体积为1% 时，在535 nm下的吸光度值（即10 mg 某一花色苷的总吸光度值）。本实验条件下各种花色苷在文中所用的提取溶剂中，ε为98.2。OD表示吸光度值；DV表示样品稀释总体积；m表示鲜果质量（g）。 　　图1 越橘中花色苷的扫描光谱（略） 　　2.3 正交实验设计 　　2.3.1 正交实验设计根据药物的性质，以测定越橘中花色苷的总固体得率及纯度为指标，以95%乙醇和1.5mol/L HCl(85∶15) pH 3.0作为提取溶剂［2］，用正交实验优选越橘中花色苷提取工艺。根据预试验结果，选取影响提取效果的因素和水平，实验方案见表1。 　　　表1 长白山高寒地区越橘中花色苷提取的影响因素（略） 　　2.3.2 样品溶液的制备按L9(34)实验列号各条件分别对提取时间，提取温度，料液比，提取次数进行优选。见表2。 　　2.3.3 总固体得率的测定精密量取样品液50 ml，称量重量，按实验条